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ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
employait, comme milieu de choix, une gélose-pomme de terre 
très consistante (3 % d’agar) (1), sur laquelle le plus grand nom- 
bre des bactéries se développe fort abondamment. Ce milieu* 
réparti en tubes et désséché pour éliminer Peau de condensation* 
servait à la préparation des semences. .Quant aux cultures mas- 
sives, elles étaient réalisées d’après la technique suivante (que 
l’on nous permettra de rappeler succinctement). 
« Comme, vases de culture, nous avons eu recours à de grandes boîtes de 
Pétri (surface : 150 c. q. environ), que l’on prépare de la façon suivante. Sur 
le fond du couvercle, on colle, avec de la gélatine, une rondelle de papier 
Chardin et on fait sécher à l’étuve. Puis, on adapte le couvercle à la boîte. 
On enveloppe celle-ci de papier filtre et on la stérilise autour Pasteur, en 
ayant soin de ne pas carboniser les rondelles qui sont destinées, on l’a deviné, 
à absorber l’eau de condensation de la gélose. D’autre part, on effile, à une 
extrémité, un certain nombre d’agitateurs, en arrondissant ensuite cette 
extrémité que l’on coiffe de ouate. Chacun des pinceaux ainsi obtenus, stéri- 
lisé au four, servira à l’ensemencement d’une boîte. La semence sera fournie 
dae pes cultures de 24 heures en tubes, à raison d’un tube par boîte. 
Ceci posé, voici comment on opère. On porte à l’autoclave un ou plusieurs- 
flacons contenant une provision de notre agar; lorsque celui-ci est fondu, 
on le coule dans une série de boîtes, en hauteur suffisante (1 c. environ), 
faute de quoi les récoltes seraient trop maigres. On aurait tort de s’ima- 
giner que, pour 20-24 heures de culture, il est possible de se contenter d’une 
mince lame de milieu solide. La presque totalité du développement micro- 
bien s’accomplit très vite, grâce à la qualité de la gélose, à la vaste aération 
de sa surface libre et à la richesse de l’ensemencement. Il faut donc une 
épaisseur assez grande de substances nutritives pour obtenir des dépôts 
convenables. 
Les boîtes remplies, on les abandonne au repos pendant un temps varia- 
ble selon la température extérieure (2 à 4 heures). L’agar fait prise et son 
eau de condensation se trouve absorbée et retenue par le papier Chardin ; il 
ne reste plus qu’à ensemencer régulièrement et largement sa surface à l’aide 
des pinceaux de ouate, manœuvre qui n’entraîne aucune érosion du milieu, 
étant donnée la consistance de celui-ci. Enfin, on porte à l’étuve et, moins 
de 24 heures après, on peut pratiquer la récolte des corps microbiens, en 
raclant la surface fertile avec de petites lames de carton souple. On les choisit 
rectangulaires (1 c., 5 sur 4 c. environ), on les stérilise par la chaleur sèche, on 
les monte extemporanément sur une pince à forcipressure flambée et, avec 
un de leurs petits côtés, on gratte doucement la gélose, en ayant soin de 
ne pas l’entamer, ce qui n’offre aucune difficulté, vu la consistance du 
milieu. » 
(1) Ünfait macérer, pendant une nuit, d’une part 500 grarnmesde viande hachée 
dans un litre d eau, d’autre part 500 grammes de pommes de terre, coupées en 
gros morceaux, dans un second litre. On mêle les deux macérés, on ajoute 
30 grammes de peptone Chapoteaut, 10 grammes de sel, 20 grammes de gly- 
cérine et 60 grammes de gélose. Le reste de la préparation n’offre rien de spécial. 
