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ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
En procédant ainsi, la température du mélange ne diminue 
guère que de 3° à 4° pendant le temps nécessaire pour avoir le 
dépôt complet des leucocytes; ce qui, avec une centrifugeuse 
donnant une moyenne de 2,500 tours à la minute, peut être faci- 
lement obtenu en 5' à 6’. Des leucocytes lavés et centrifugés 
ainsi deux, trois et même quatre fois ne paraissent pas sensible- 
ment altérés. Dans chaque expérience, Texsudat péritonéal et le 
sérum provenaient du même animal. Avant de pratiquer l’in- 
jection péritonéale en vue de provoquer la formation de l’exsudât, 
nous retirions, à l’aide d’une seringue et par ponction directe du 
cœur, 2 c. c. de sang. 
Nous nous sommes arrangés de façon à opérer toujours sur 
des exsudats d’âge comparable, 15 heures environ. Pendant ce 
temps le sérum avait le temps de se faire, de se séparer du caillot 
et tout était prêt pour les essais. Tous les dosages ont été faits 
vis-à-vis de dix doses mortelles de virus, soit 1 /200 de culture 
sur gélose âgée de 24 heures. Chaque série était complétée par 
deux témoins, dont l’un recevait la dose minima mortelle 
(1 /2000 de culture) et l’autre dix doses mortelles. 
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11 est extrêmement facile, nous l’avons déjà dit, d’immuniser 
le cobaye vis-à-vis d’une dose plusieurs fois mortelle de v. Mpt- 
chniknoi. 
D’une série de 30 cobayes (400-500 grammes) ayant tous 
reçu le 25 et le 31 juilet 1 /10 et 1 /5 de culture sur gélosa de 
vibrions tués par un chauffage de 1 /2 heure à 60°, en injection 
péritonéale, 8 reçurent le 10 août, toujours dans le péritoine, 
1 /100 de culture sur gélose, soit 20 doses mortelles de virus 
vivant. 
Pendant les premières heures qui suivirent l’injection viru- 
lente, tous les cobayes présentèrent des signes non douteux d’une 
violente réaction péritonéale; mais tous, sans exception, étaient 
complètement rétablis, le lendemain. 
12 cobayes de la série n’ayant reçu que les 2 injections de 
microbes morts furent utilisés pour nos premiers essais, par 
séries de 4 et de 2, du 11 au 14 août. 
Le 11 août, 4 cobayes vaccinés et 4 cobayes neufs sont soumis 
