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A. Benedicenti e Silvio Rebello 
proteínas e nos extractos dos órgãos tratados com êste metal em pó, e, 
ainda, que também possa constituir um índice colorimétrico das quanti- 
dades fixadas, diremos agora, em poucas palavras, o modo por que êste 
reagente deve ser usado. 
Um primeiro cuidado consiste em usar solutos recentemente prepara- 
dos. A concentração de que nos servimos habitualmente foi de 0,5 7o. A 
adição de soluto de hematoxilina a um líquido contendo cobre deter- 
mina o aparecimento de um colorido azul intenso e a formação de uma 
verdadeira laca que lentamente precipita para o fundo do tubo. Para a 
formação e precipitação desta laca é preciso um certo tempo, como já ou- 
tros autores observaram para a precipitação da substância córante que re- 
sulta da reacção entre o hidróxido de ferro e a hematoxilina. Êste tempo 
de formação e de precipitação da laca pode ser muito longo, como tive- 
mos ocasião de observar, pesquisando o cobre fixado pelos extractos de 
fígado; mas na nossa nota sucessiva explicaremos êste curioso atraso. 
Verificam-se, muitas vezes, estes atrasos das reacções quando estas se dão 
entre reagentes e metais mais ou menos dissimulados em complexos quí- 
micos. 
Já em um trabalho anterior tínhamos feito notar que, fazendo passar 
uma pequena quantidade de sulfídrico pelo soluto de uma metalo-proteína 
(ovo-albumina), o metal não é revelado imediatamente e só pouco a pouco 
é que o soluto se vai tornando castanho. A acção de massa tem, na 
verdade, uma notável influência pois que com maiores quantidades de 
reagentes (sulfídrico ou sulfureto de amónio) a reacção positiva se pode 
obter muito mais rápidamente. Também com a hematoxilina acontece al- 
guma coisa de análogo: uma única gota de reagente dá muitas vezes uma 
reacção negativa ou quási, tornando-se esta evidente pela adição de uma 
segunda ou terceira gota. Daí a vantagem de usar o reagente em soluto 
diluído e ir juntando gotas emquanto se vir aumentar a intensidade da 
cor característica. 
Convêm, igualmente, não esquecer que a hematoxilina é uma substân- 
cia que muda de cor segundo a [H‘] (concentração hidrogeniónica) do lí- 
quido no qual se encontra e que não serão, portanto, atendíveis e con- 
frontáveis entre si senão as determinações feitas em líquidos cujo pn (ex- 
poente hidrogeniónico, de Sõrensen) seja aproximadamente idêntico. 
Como êste expoente hidrogeniónico varie fácilmente nos solutos protei- 
cos e nos extractos de órgãos e como possa também modificar-se pela 
acção do tratamento com os metais, vê-lo-hemos na nota successiva. So- 
bre êste assunto em especial temos em andamento bem mais exactas 
pesquisas. 
