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ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
elle ne donne pas toujours des résultats satisfaisants, par suite 
de l’acide carbonique qui se dégage. Il était impossible au 
commencement d’employer la méthode colorimétrique de 
Sorensen parce que l’indicateur coloré, proposé par lui, intro- 
duisait, une erreur due à la présence des protéines, ce qui 
rendait impossible l’emploi de cette méthode dans des solutions 
qui contenaient des substances albuminoïdes. 
Nous devons au chercheur américain William Mansfield 
Clark d’avoir adapté la méthode colorimétrique de Sorensen à 
un but bactériologique, en préparant une série d'indicateurs 
donnant un minimum d’erreurs. Les travaux de Clark et Lubs 
(1917) sont maintenant considérés comme classiques, et spécia- 
lement en Amérique et en Angleterre, et Ponselle vient, dans le 
Bulletin de l' Institut Pasteur (1920), d’attirer sur eux l’attention 
des bactériologistes français. 
Leur importance réside dans le fait qu’ils permettent de fixer 
d'une façon certaine la réaction initiale d'un milieu de culture. 
Par suite, si nous préparons deux bouillons de viande de la 
même manière et si nous ajoutons, par exemple, dans chaque 
ballon 20 cent, cubes de NaOHtt. par litre, il n'est nullement 
certain a priori que la concentration (H) sera la même dans 
les deux cas. Les bactériologistes connaissent bien les grandes 
difficultés qu’on a à préparer un milieu de culture pour des 
microbes très sensibles à l’acidité ou à l’alcalinité du milieu. 
Quand on ensemence dix bouillons préparés exactement 
d’après les mêmes prescriptions et titrés au même degré 
d’alcalinité, avec le bacille diphtérique, souvent quelques-uns 
seulement fournissent une bonne culture. Il en est de même 
pour le pneumocoque. Dernby et ses collaborateurs ont étudié 
l’influence de la concentration d’ (II) (Dernby et Avery; D. et 
David) pour ces deux microbes et ont trouvé qu'il est indispen- 
sable de contrôler la concentration (H). 
Les premiers travaux sur les rapports entre la concentration 
(H) et la vie des bactéries eurent trait à la « valeur limite 
de pH », qui fut considérée comme un facteur significatif 
dans la classification des micro-organismes. Citons, comme 
exemple, les recherches de Michaelis et Marcora, et aussi de 
Clark pour le B. coli ; Ayers (1916), Cullen et Avery pour le 
streptocoque et Itano (1916) pour le Bacillus subtilis. On trouva 
