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ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
du sang au bouillon. Ceci est fort possible, mais nous avons 
précisément évité l'emploi du sucre, pour obtenir un optimum 
rigoureux et éviter ainsi une trop grande augmentation d’aci- 
dité au cours des essais. Cependant le travail de Jones montre 
que nous devons être très prudents en considérant comme 
tacteur absolu la valeur limite de/>H. 
MÉTHODES. 
a) Préparation du milieu. 
On doit choisir un milieu approprié, de préférence liquide 
afin de pouvoir facilement mesurer la concentration (H), et en 
deuxième lieu, il ne doit pascontenir de substances fermentes- 
cibles qui par production d’acide peuvent déterminer une 
modification de la concentration (H). 
Un tel milieu est le bouillon de viande autolysé : 9 échantil- 
lons préparés à l'acide de ce milieu furent employés; tous 
contenaient la même quantité de bouillon, mais des proportions 
différentes cTIlCl ou NaOTI afin d’obtenir des concentrations (H) 
différentes pouvant être facilement reproduites. 
Dans cette méthode toutes nos expériences ont été exécutées 
d’une façon uniforme, et par ce moyen, beaucoup d'erreurs 
furent évitées. 
I kilogramme de viande iinement hachée lut plongé dans deux litres 
d’eau ordinaire et maintenu à la température de 37° pendant vingt-quatre 
heures pour l’autolyse, ensuite bouilli et filtré. On y ajoute 0,5jp. 100 de NaCI 
et 0,5 p. 100 de peptone, puis on stérilise pendant vingt minutes à 110°. 
Le bouillon fut divisé en parties égales et versé dans 9 ballons, dans 
lesquels différentes quantités de HCl ou NaOH furent ajoutées, afin d’obtenir 
une série de concentrations (H) définies. Le tableau n° I indiquera compo- 
sition des 9 milieux -types, ainsi obtenus : 
II est avantageux de préparer une grande quantité de bouillon pour avoir 
des résultats comparables. Les chiffres du tableau ne sont valables que 
pour le bouillon utilisé, pour une nouvelle fabrication les valeurs jaHTioivent 
être vérifiées. 
Le contenu des 9 ballons fut alors divisé en neuf séries de tubes à essai, 
10 cent, cubes et tous les tubes furent restérilisés. On les laissa une journée 
à la température ambiante, afin d’obtenir une concentration stable en ions 
hydrogène» 
