292 
ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
Reste à clarifier l'émulsion au moyen d’une solution de soude à 1 p. 100. 
Ce temps est le plus délicat de la préparation : l’excès de soude rend le 
milieu impropre à la culture, le défaut de soude nuit à la transparence du 
milieu. 
On évite ces écueils en versant d’abord une quantité de soude égale à la 
moitié de la quantité de jaunes réunis ; ainsi, à 350 cent, cubes de jaune on 
ajoute — par petites portions — 175 cent, cubes de solution de soude à 
1 p. 100. On s’arrête un moment pour s’assurer du degré de la solubilisation 
ainsi réalisée; puis, on procède à de petites additions de 1 à 1 cent, cube 5 
de soude, en aspirant chaque fois le jaune dans une pipette. On suit de la 
sorte la clarification ; celle-ci est arrivée au point optimum lorsque le liquide 
apparaît transparent en couche mince, dans la pipette par exemple, et qu'il 
reste légèrement opaque en couche épaisse, vu à travers les parois du verre 
à pied. Une dizaine de centimètres cubes ajoutés à 175 cent, cubes précé- 
demment versés y suffisent généralement. 
Avec de l’eau distillée on complète jusqu'à obtenir — dans le cas particu- 
lier — sept litres de liquide, dans lequel le jaune est représenté dans la pro- 
portion de 1 : 20 (350 : 7.000 = 1 : 20). Le milieu est réparti en boîtes de Roux 
(50 à 150 cent, cubes) et stérilisé à 110° pendant vingt minutes. 
Il est bon d’être prévenu que la quantité de soude nécessaire pour dis- 
soudre le jaune d’œuf n’est pas toujours la même ; ainsi, nous avons rencontré 
des jaunes dont la dissolution demandait presque deux fois moins de soude 
que la quantité que nous venons d’indiquer. 
Dans ce milieu qui ue renferme que le jaune d'œuf dissous, 
auquel il n’est ajouté ni macération de viande , ni peptone, ni 
sel, ni glycérine, les bacilles tuberculeux poussent en profon- 
deur, sous forme de filaments blancs, extrêmement ténus. 
Pour avoir des cultures riches, il y a lieu de procéder à de 
larges ensemencements. Dès le lendemain, on se rend compte, 
par une simple inspection, que la culture est en marche. De jour 
en jour sa richesse augmente. 
Au quatrième jour, elle est assez abondante pour qu’elle 
puisse servir à la préparation de l'antigène en vue des réactions 
de fixation (1). 
Vers le quinzième jour, tout le fond de la boîte de Roux se 
trouve tapissé d'un lin voile blanc que la moindre secousse brise 
et transforme en une poussière extrêmement fine. Les bacilles 
continuent à se développer pendant deux mois environ. 
Quel que soit l’âge de la culture, il ne s’en dégage jamais 
cette odeur pénétrante, bien connue, que l’on rattache à la 
présence de la tuberculine. 
(1) La préparation d’antigène est d’une grande simplicité, celui-ci n’étant 
autre chose qu’une culture âgée de quatre jours, stérilisée et rendue homo- 
gène par agitation. L’émulsion-mère conserve indéfiniment ses propriétés. 
