ISOLEMENT DES BACILLES DE KOCH (MÉTHODE DE PÉTROF) 559 
augmente la proportion de solution de soude jusqu’à trois et 
quatre fois le volume du crachat. On agite vigoureusement et 
on porte à l’étuve à 37° pendant trente minutes. On agite à 
nouveau et on reporte encore trente minutes à l’étuve. On 
centrifuge pendant un quart d’heure, puis on enlève le liquide 
surnageant de façon à n’en laisser que deux ou trois gouttes 
au-dessus du culot. Si l’opération a été bien conduite, le sédi- 
ment ne doit pas avoir de consistance glaireuse et doit être 
exempt de grumeaux. On ajoute quatre à cinq gouttes d’HGl à 
4 p. 100. On vérifie la réaction acide au tournesol et on aspire 
à la pipette le sédiment émulsionné par agitation dans le 
liquide surnageant. Il ne reste plus qu’à ensemencer celui-ci 
sur cinq tubes du milieu spécial coloré, en-versant à la surface 
de chaque tube trois à quatre gouttes de l’émulsion. On recherche 
par la même occasion la présence de bacilles de Koch dans le 
crachat en déposant une goutte de l’émulsion sur une lame 
lavée préalablement à l’acide chlorhydrique. Cette dernière 
manœuvre a pour but de faire adhérer à la lame le sédiment 
qui se fixe très mal sur le verre ordinaire. On colore ensuite 
par la technique de Ziehl-Nielsen. 
Préparation du milieu de Pétrof. 
Prendre 250 grammes de veau frais écrasé au hachoir stérile ; 
Ajouter 212 grammes d'eau distillée, 
Et 37 gr. 5 de glycérine stérile. 
Placer le tout à la glacière pendant une nuit, puis filtrer sur gaze stéiile. 
Prendre d’autre part des œufs frais (16 à 20), désinfecter la coquille pai 
immersion quinze minutes dans l'alcool à 70°. Les casser en les manipulant 
avec des gants de caoutchouc stérilisés. 
Mélanger intimement blanc et jaune, puis filtrer sur gaze stérile. 
* Mélanger : 200 cent, cubes de filtrat de viande avec 
400 cent, cubes de filtrat d’œuf. 
Ajouter, pour 100 cent, cubes de ce mélange, 1 cent, cube de la solution 
suivante : 
Violet de gentiane 0 gr. 5 
Alcool à 50 cent - cubes. 
Bien mélanger, puis répartir en tubes. 
Coaguler, comme pour le sérum, à l’étuve à : 
85° pendant 30 minutes le premier jour; 
750 30 — le deuxième jour; 
750 _ 30 — le troisième jour. 
