FORMATION DES ANTICOHPS 
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substances particulières ayant la même action que le complé- 
ment, et ne disparaissant qu'à cette température élevée (1). 
Shirnoff conseille même de chauffer le sérum pendant 
une heure quinze à 60° (2). Nous avons reconnu, au cours de 
nos recherches, que ce chauffage à 60° rend la réaction beaucoup 
plus sensible, dans le cas où le taux des anticorps est peu 
élevé. Buxton (3) recommande, dans le cas du sérum de mulet, 
de chauffer à 62° pendant quinze minutes; ce chauffage n’altère 
pas les anticorps. 
Antigène. — Après de nombreux essais, nous avons utilisé 
comme antigène la préparation suivante : à 20 cent, cubes d’eau 
physiologique à 9 pour 1000, on ajoute 2 centigr. de corps 
microbiens tués, provenant de cultures ayant servi à la fabri- 
cation de la malléine. Pour débarrasser les bacilles morveux de 
l’excès de glycérine qu’ils possèdent, on centrifuge l’émulsion ; 
le liquide surnageant est décanté, et on le remplace par un 
égal volume d'eau physiologique. Cette opération est recom- 
mencée deux fois. La suspension microbienne est ensuite 
portée à l’ébullition pendant cinq minutes. Nous avons aussi 
employé une émulsion faite avec des microbes préparés pai 
l’alcool-éther. Nous sommes partis d’une culture abondante en 
bouillon glycériné, âgée de six jours ; les bacilles ont été tués 
par un chauffage de deux heures au bain-marie à 60 . Les 
germes, réunis par centrifugation, sont débarrassés de leur 
excès de glycérine, par deux lavages succédant à deux 
centrifugations. Le culot obtenu est déshydraté par l’alcool; on 
ajoute ensuite partie égale d’éther. On laisse agir le mélange 
vingt-quatre heures; on décante le liquide surnageant, et les 
corps microbiens sont mis à dessécher dans une boîte de Pétri, 
soit à l’étuve, soit dans le vide sulfurique. Les germes secs 
sont broyés dans un tube métallique, avec des billes de bronze 
par agitation mécanique, ou dans un mortier d agate. On les 
(1) Wladimiroff, Malleus ; in Kolle et Wassermann. Handbuch derpathogenen 
réaction de fixation pour le diagnostic de 
la ( r/ 1 * * * V B Imperature required for the inactivation of mule 
blood for the complément fixation test for glanders. Veter. Journ ., jui 
1917. 
