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ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
emploie en émulsion, à raison de 1 centigramme pour 50 cent, 
cubes d’eau physiologique. On obtient ainsi un antigène sen- 
siblement aussi aclil que le précédent, et qui a le précieux 
avantage de se conserver indéfiniment, à condition de le 
mettre à labri de l'humidité. 
Quant à la malléine elle-même, diluée au taux indiqué par 
Ciuca (J), elle n’a pas toujours, comme antigène, une valeur 
constante : les résultats obtenus avec le même sérum, et dans 
des conditions identiques de réaction, n’étant pas comparables 
entre eux. Nous 1 avons donc abandonnée, dès nos premières 
recherches. 
Alexine. — Nous avons utilisé exclusivement le sérum frais 
de cobaye dilué au 1/1 5 e et dont le titrage était fait au moment 
de chaque réaction. 
Hématies lavées. — Nous nous sommes servis uniquement 
de globules de mouton. Les hématies doivent être lavées trois 
lois avec beaucoup de soin, pour enlever les substances anti- 
hémolytiques du sérum qui pourraient adhérer à leurs parois. 
Ces globules sont employés en suspension à 5 p. 100, dans de 
l’eau physiologique. 
Sérlm hémolytique. Nous avons obtenu un bon sérum 
hémolytique vis-à-vis des hématies de mouton, en injectant 
sous la peau d’un cheval 15 cent, cubes de ces globules préa- 
lablement lavés quatre ou cinq fois. Cette injection est ensuite 
répétée toutes les semaines à la dose de 20 cent, cubes. Il nous 
a tallu six semaines pour avoir un sérum actif. Ce sérum, 
inactivé par un chauffage à 56°, pendant trente minutes, est 
titré chaque fois, avant son emploi. 
Iechnique de l\ réaction. — Nous avons suivi celle qui est 
appliquée au laboratoire de M. Besredka à l’Institut Pasteur, et 
qui consiste à employer une dose constante d’antigène et de 
sérum, et une quantité variable d’alexine. Le dispositif que 
nous avons adopté est le suivant : on utilise un portoir à deux 
(1) Ciuca, loc. cil. 
