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ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
Après une centrifugation d’un quart d’heure, le sang qu’on avait porté dans 
la turbine est coagulé dans le tube ; le caillot se trouve tassé dans le fond et 
un liquide clair surnage. 
On décante le sérum à l'aide d’une pipette à boule stérile et on le répartit 
dans quelques tubes stérilisés. Quelquefois le tube de la centrifugeuse offre 
un tout autre aspect. Le sang est pris en masse en un caillot compact qui 
ne laisse pas exsuder de sérum. On fait alors avec un bistouri stérilisé 
quelques incisions dans le caillot, on centrifuge de nouveau pendant un 
quart d’heure et, après ce temps, on obtient un sérum clair qu’on répartit 
comme précédemment dans des tubes stérilisés. C’est dans des sérums 
ainsi préparés que nous avons recherché la présence d’anticorps spé- 
cifiques. 
b) Immunisation par injection lente. — Le procédé d’immu- 
nisation qui vient d’être décrit présente de nombreux inconvé- 
nients. En effet, on ne peut jamais être sûr d’avoir un chien 
immunisé après les cinq heures d’attente. De plus, l’animal 
qui a reçu une première injection de peptone s’agite à l’infir- 
merie et, comme son sang est incoagulable, il fait quelquefois 
de très graves hémorragies. Nous avons eu même, rarement il 
est vrai, des cas de mort subite entre les deux injections de 
peptone. 
On peut employer une autre méthode d’immunisation qui 
est celle de l’injection lente. Voici comment on procède : 
Un chien de 12 à 15 kilogrammes est immobilisé sur la gouttière de 
Claude Bernard, on le rase au cou et à la patte ; on isole la carotide et la 
veine pédieuse. On fixe une canule métallique, munie de son mandrin, dans 
la carotide, et une aiguille de seringue à bout olivaire dans la veine pédieuse. 
On fait une prise de sang de 10 cent, cubes environ, à la carotide; on le 
reçoit dans un petit verre conique et on note le temps de la coagulation. 
On procède alors à l’injection de la peptone. On se sert pour cela de la 
solution dont on a usé précédemment, c’est-à-dire une solution à 10 p. 100, 
dont on injectera 3 cent, cubes par kilogramme d’animal. On fait l’injection 
comme il suit : on injecte dans la veine pédieuse 0,5 cent, cube et on 
attend cinq minutes ; puis de nouveau 0,5 cent, cube avec un repos de cinq 
minutes et ainsi quatre fois de suite. On injecte ensuite 2 cent, cubes toutes 
les cinq minutes. Un chien de 15 kilogrammes reçoit ainsi 45 cent, cubes de 
peptone en deux heures environ. Pendant le cours des injections, on fait de 
temps à autre des prises à la carotide et on constate que le sang coagule 
normalement. Jamais l’animal ne présente d’agitation, il se plaint de temps 
à autre comme tout chien immobilisé. 
Quand toute la peptone a été injectée, on fait une saignée de 50 cent, cubes 
et on porte le sang à la centrifugeuse. On injecte alors brusquement de la 
peptone dans les veines à raison de 0 gr. 30 par kilogramme d’animal ; on ne 
constate aucune excitation. Une saignée faite dix minutes après cette injec- 
tion montre que le sang coagule normalement. 
Après quinze minutes de centrifugation, on décante le sérum provenant 
de la saignée précédente et on le répartit dans des tubes stérilisés. 
