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ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
J’ai essayé aussi, mais sans réussir, d'avoir des œufs stériles en produi- 
sant la fécondation artificielle. 
(Pour cela, on ouvrait une femelle sur le point de frayer. On enlevait avec 
une pince stérile une partie des œufs contenus dans les utérus et on les 
plaçait à sec dans un cristallisoir stérile. On sacrifiait un mâle, on prélevait 
le contenu des vésicules séminales, et on le versait sur les œufs. Quatre ou 
cinq minutes plus tard, on versait de l'eau stérile de manière à recouvrir les 
vésicules. Ceux-ci se développaient normalement; malheureusement, par ce 
procédé, je n’ai jamais pu avoir de têtards stériles.) 
La membrane interne de l’œuf ainsi stérilisée était déchirée à l’aide de 
deux aiguilles stériles. Le petit têtard était transporté successivement dans 
plusieurs tubes d’eau stérile (à l'aide de pipettes stériles, et en changeant 
de pipette chaque fois). 
La dissociation de la membrane interne présente une certaine difficulté; le 
mieux est de laisser le têtard se placer sur le flanc, de mettre les pointes 
des aiguilles du côté de la concavité dorsale et de les écarter brusquement 
l’une de l’autre. La membrane éclate et projette le têtard au dehors. 
Après avoir été ainsi lavés, les iélards restaient pendant une 
semaine environ (quatre jours dans les premières expériences) 
dans des tubes d’eau stérile. Tout d’abord, ils tombent au fond 
du tube ; le lendemain et le surlendemain, ils montent le long de 
la paroi et bientôt se mettent à nager activement; l'ensemen- 
cement de l'eau au bout de huit jours renseigne donc assez 
bien sur l’absence ou la présence de microbes. Les têtards qui 
se sont montrés stériles sont ensuite transportés dans les bal- 
lons d’élevage. 
Dispositif d’élevage (Fig. 1). 
Il consiste*: 1° En une série de ballons munis d’une tubulure latérale. Le col 
du ballon est fermé par un bouchon en caoutchouc à deux orifices et protégé 
au-dessus et en dessous par des bouclions de coton. Par chacun des orifices 
passe un tube en verre recourbé à angle droit à son extrémité supérieure, 
bouchée au coton. L'un de ces tubes plonge au fond du ballon et sert à l’ar- 
rivée de l’air. L’autre servant à sa sortie ne dépasse pas la base du col. Le 
premier de ces tubes est encore muni d’un bouchon en caoutchouc traversé 
par un petit tube en verre. 
2° Un cylindre en cuivre muni d'une tubulure supérieure pour l’arrivée de 
l'air et de 30 tubes latéraux (portant chacun un tube en caoutchouc fermé à 
l'aide d’une pince) destinés à sa distribution. Ce cylindre est stérilisé à 
l’autoclave. 
Le courant d'air est fourni par une trompe à eau (à pression). L’air est 
filtré sur une série de trois gros filtres de coton préalablement stérilisés à 
l'autoclave avec les tubes de caoutchouc qui les réunissent entre eux et au 
cylindre distributeur. 
Les têtards sont introduits dans les ballons par la tubulure latérale qui, 
