DÉVELOPPEMENT DE L’ASPERGILLUS NIGER 395 
un changement assez grand cle volume et de concentration des 
liquides, changement encore différent pour les tubes placés au 
milieu et sur le pourtour du panier contenant les tubes. 
On fut donc obligé de se servir de la méthode suivante : on 
stérilisait à sec les tubes vides bouchés de coton et des pipettes 
graduées; on stérilisait les acides dans des tubes scellés et le 
liquide de Raulin et l’eau dans des matras à l’autoclave. Après 
cette stérilisation des objets et des liquides, on versait avec 
toutes les précautions de stérilité possibles dans une chambre 
où l’air était en repos les quantités nécessaires des liquides 
(liquide de Raulin, acide, eau) dans les tubes, et on obtenait 
ainsi des milieux dans lesquels je n’ai jamais pu remarquer, 
sans ensemencement, un développement quelconque meme 
dans les cas où le milieu de culture était très favorable et où 
l’on avait laissé les tubes pendant deux à quatre mois sans 
ensemencement. Il s’ensuit que l’on opérait bien sur les 
milieux exactement connus et avec des cultures pures. 
Dans le cas où on ne pouvait pas stériliser les acides sans 
qu’ils se décomposassent, il s’ajoutait encore la complication 
de préparer les solutions titrées, stériles et non composées 
(acides chloracétiques) : on introduisait une quantité de ces 
acides dans un tube stérilisé et on ajoutait après un certain 
temps de l’eau stérilisée; on titrait, en prenant une quantité de 
la solution avec une pipette stérilisée, et on préparait les solu- 
tions nécessaires dans des fioles jaugées stérilisées. Dans toutes 
les expériences on n’a jamais trouvé de contamination. 
Dans certains cas, où la dose limite d’acide était très élevé, 
on ne pouvait pas ajouter la quantité voulue d’acide en solution 
séparée; dans ce cas, on stérilisait les cristaux dans des tubes à 
F autoclave; on ajoutait ensuite 10 cent, cubes de liquide de 
Raulin, et on remplissait avec de l’eau jusqu’à 15 cent, cubes 
d’après une marque faite sur le tube. Quoique le remplissage 
par suite de la largeur du tube ne pût pas être tout à fait précis, 
on obtenait une exactitude suffisante. 
Pour les ensemencements, j’employais une seule race iïAsper- 
gillus niger , cultivée dans le laboratoire, que je réensemençais 
toutes les deux semaines environ pour avoir toujours une 
culture jeune et forte. 
Les phénomènes étudiés étaient la germination, la formation 
