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ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUK 
l'alcool éther mise dans un tube à essais, laisse tout d’abord 
déposer des cristaux incolores ou légèrement jaunâtres pris- 
matiques et souvent maclés. Peu à peu, la solution jaune clair 
fonce et devient rougeâtre. En même temps que les prismes, on 
observe la formation d’aiguilles feutrées rouges. A la fin, il n'y 
a plus que ces aiguilles, qui sont les cristaux de la tétrazone du 
biacétyle.. 
Cette oxydation est rapide si la solution présente une large 
surface à l’air et on doit en tenir compte quand on effectue 
la purification de l’osazone. 
Traitée par l’acide dilué à l’ébullition, cette phénylosazone 
donne, à la rectification, un liquide vert qui n’est autre que le 
biacétyle. 
Donc l'acétylméthylcarbinol est bien un des produits que' 
l’on trouve dans les cultures du B. subtilis. Mais pour savoir 
s’il permet d’expliquer les échanges gazeux observés, il est 
nécessaire de le doser. 
Je ne développerai pas ici les notions qui m’ont permis 
d’établir une méthode analytique et je ne ferai qu’exposer 
cette dernière. 
Je distille dans le vide, sans dépasser une température de 
45-50 degrés, une quantité exactement mesurée de culture : 
50 cent, cubes par exemple. Le résidu est repris par un peu 
d’eau et, si l’extrait est abondant, j’ajoute quelques boules de 
verre et j’agite fortement de manière à dissoudre tous les pro- 
duits solubles. Je distille dans le vide. Je répète cette opéraiion 
quatre à cinq fois, puis je, vérifie qu'une nouvelle distillation 
ne donne plus de produits réducteurs. S'il n’en est pas ainsi je 
fais encore quelques lavages. Les distilla ts sont réunis et 
amenés à un volume exactement mesuré. Je dose le pouvoir 
réducteur sur une partie aiiquote de ce liquide. Pour cela, 
j’emploie le procédé indiqué par M.G. Bertrand pour les sucres. 
J’ai vérifié que, dans les limites dans lesquelles on opère 
(170 milligrammes de cuivre au plus pour 20 cent, cubes de 
distillât), le pouvoir réducteur est proportionnel à la concentra- 
tion. D'autre part, il dépend presque exclusivement de l’acé- 
tylméthylcarbinol. 
D après ivling, 1 gramme de cette cétone réduit à l’état d’oxy- 
dule 2 gr. 85 de cuivre. J’ai multiplié la quantité de cuivre 
