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ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
Préparation des réactifs. — 3 solutions sont nécessaires : 
1° Solution de formol acétique (liquide de Ruge) : 
Acide acétique pur 1 cent. cube. 
Formol à 40 p. 100, dit du commerce ... 2 cent, cubes. 
Eau distillée 100 Cent, cubes. 
2° Mordant au tanin : 
Tanin à l’alcool ou à l’éther 1 gramme. 
Eau distillée 20 cent, cubes. 
Dissoudre le tanin dans l’eau très chaude. Conserver en flacon bien bouché 
et additionné d'un morceau de camphre pour éviter le développement des 
moisissures. 
3° Solution de nitrate d'argent ammoniacal (liquide de Fontana) : 
Nitrate d'argent .1 gramme. 
Eau distillée 20 cent, cubes. 
Dissoudre à froid. Verser une certaine quantité de cette solution dans un 
verre à pied très propre. Ajouter peu à peu de l’ammoniaque avec une 
pipette, en agitant constamment avec une baguette de verre ; il se forme un 
précipité brunâtre qui fonce progressivement, puis se décolore assez brusque- 
ment. A partir du moment où la décoloration commence, on ne versera plus 
l’ammoniaque que très prudemment, et on s’arrêtera quand la solution est 
encore légèrement opalescente; si elle devient eau de roche, ajouter lente- 
ment un peu de solution de nitrate d’argent jusqu’à production de la faible 
opalescence désirée. 
Mode d’emploi des réactifs. — Arroser la préparation de solu- 
tion de formol acétique qu’on renouvelle plusieurs fois, et 
qu’on laisse agir en tout de 1 à 5 minutes. Insisler pour que le 
frottis soit complètement déshémoglobinisé, car l’hémoglobine 
accapare le nitrate d’argent, masque les spirochètes et gêne leur 
coloration. Egoutter. 
Quand on a à nitrater du suc d’ulcérations, ce qui est le cas 
le plus fréquent, il suffit de laver à l’alcool absolu (ou à 80°-95°). 
Sécher au papier filtre; ou bien mettre le feu à ce qui reste 
d’alcool sur la lame et, presque aussitôt, souffler fortement sur 
elle, de son talon vers son extrémité (de cette façon, et d’un 
même coup, la flamme est éteinte, le frottis asséché, et une 
fixation par chauffage modéré réalisée). 
Quand il s’agit de frottis d’organes (foie, cerveau, ...), il 
faut chasser les graisses qui gêneraient l’imprégnation par un 
triple lavage : à l’alcool, puis à l’éther, et enfin de nouveau à 
l’alcool. 
