QUELQUES COLORANTS ET PROCÉDÉS DE COLORATION 431 
Préparation des réactifs. — Deux réactifs sont nécessaires : une solution 
mordançante à l’alun-tanin et une solution colorante au cristal violet. Leur 
préparation demande un peu d'attention, car c'est d'elle surtout que dépend 
la réussite des colorations. 
o 10 Mordant à V alun-tanin. — Faire une solution saturée d'alun, à raison de 
13 grammes d’alun de potasse pulvérisé au mortier, pour 100 cent, cubes 
deau distillée chaude; laisser reposer tranquillement, au frais, pendant une 
bonne journée, de façon que l’excès d’alun ait le temps de cristalliser; 
decanter et filtrer. 
Préparer, d autre part, une solution, de tanin, à raison de 10 grammes de 
tanin à l’éther (ou à défaut à l’alcool) pour 100 cent, cubes d’eau distillée 
chaude. 
Mélanger les deux solutions précédentes dans la proportion de 2 volumes 
de solution d’alun pour 1 volume de solution de tanin. Chauffer le mélange 
à 120°, dans 1 autoclave, pendant une demi-heure (important, car sans celte 
piécaulion, certains tanins sont inutilisables). Filtrer chaud, sur papier filtre, 
au sortir de l'autoclave; refiltrer après refroidissement s’il existe un trouble! 
Le liquide brun obtenu constitue le mordant. 
-° Colorant au cristal violet. — Faire une solution alcoolique mère de cristal 
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\iolet à gQ. Pour cela, pulvériser le cristal violet au mortier, verser dans un 
flacon, ajouter 20 cent, cubes d’alcool éthylique absolu par gramme de 
poudre. 
Se servir de cette solution mère pour préparer, en petite quantité, 3 solu- 
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lions Plus étendues, à 2 ÔÔ» IôÔ et 5Ô’ qui P erm ettront de trouver le titre de 
la solution optima à employer pour les colorations. Par exemple ; 
Sol. mère, 1 vol. -f- aie. éthylique abs.. 9 vol. — colorant à 1 p. 200 
— 2 vol. -f- — 8 vol. = — à 1 p. 100 
4 vol. -{- — 6 vol. = — à 1 p. 50 
Rechercher, par tâtonnements, quelle est, de ces 3 solutions colorantes, 
celle qui convient le mieux. 
Pour cela, verser dans une casserole métallique de ménage d’enfant, ou 
dans une petite capsule de porcelaine, 5 cent, cubes de mordant, puis 
0 c. c. 5 de l’une des solutions colorantes précédentes (mesurer avec 
deux pipettes graduées appropriées). Un tour pour mélanger. Chauffer au 
bec Bunsen ou à toute autre grosse flamme équivalente. Aussitôt l’ébullition 
obtenue, sortir de la flamme, donner un tour et verser sur la lame portant 
les microbes, de façon à recouvrir abondamment, d’un seul coup, la surface 
à colorer. Laisser agir une vingtaine de secondes, trente au plus. Puis, laver 
à l’eau ordinaire, versée brusquement sur le talon de la lame, de façon à 
entraîner le colorant avec sa pellicule de surface, qui pourrait adhérer à la 
préparation si on rejetait le colorant avant de laver. Egoutter, sécher au 
papier filtre, puis en s’aidant d’une flamme. 
Procéder de la même façon pour les 2 autres solutions colorantes, en 
ayant soin, après chaque essai, d’enlever la couche de violet adhérente aux 
parois de la casserole ou de la capsule en y faisant bouillir un peu de mor- 
dant à l’alun-tanin, de la rincer à l’eau ordinaire, et de l’essuyer. 
Comparer entre eux les résultats obtenus : 1<> au point de vue de la rapi- 
dité de l’apparition du précipité ; 2° au 'point de vue de l’imprégnation des 
cils. 
