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ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
1° Une observation attentive du colorant au cours même de son emploi 
permet de reconnaître la solution la plus favorable à ce quelle commence a 
précipiter dès qu'elle a été versée sur la lame ou dans les 5 secondes qui suivent. 
Un colorant qui contient déjà un précipité bien apparent au moment ou on 
le verse sur la lame, est trop riche en cristal violet; un colorant qui tarde 
à précipiter une fois versé est trop pauvre en cristal violet; dans les deux 
cas il n’est pas bon. 
2° Un examen microscopique des préparations vient ensuite complétei 
l’observation précédente, en montrant quelle est celle qui présente à la fois 
les cils le mieux colorés et le fond le moins encombré de précipités. 
— Cette épreuve terminée, on sait à quel titre il faut ramener la solution 
alcoolique mère pour la transformer en solution colorante optima. Il est 
exceptionnel d’avoir à essayer des solutions plus étendues que 1 p. 200 ou 
plus concentrées que 1 p. 50 pour acquérir cette notion 
— D’ordinaire, c'est la solution alcoolique de cristal violet à 1 p. 100 qui 
remplit les conditions requises. 
— Le résultat du titrage est valable ultérieurement pour de nouvelles 
solutions, à condition de se servir toujours du même lot de pioduits . 
alun, cristal violet et surtout tanin. 
Mode d’emploi des réactifs. — La technique de coloration 
des préparations ne diffère en rien de celle qui a été indiquée 
pour éprouver les solutions de cristal-violet. Donc . addition- 
ner 5 cent, cubes de mordant de 0 c.c. 5 de solution optima 
de cristal- violet; porter le mélange à l’ébullition; verser 
bouillant sur les microbes; laisser agir environ 20 secondes; 
laver; sécher. 
Nettoyer le récipient en y faisant bouillir du mordant et en 
le rinçant à l’eau ordinaire, après chaque coloration. 
Résultats. — Les microbes sont colorés en violet foncé, les 
cils en violet un peu plus pâle. Tous les cils, à quelque espèce 
microbienne qu’ils appartiennent, sont colorables par cette 
méthode. 
Il y a toujours un certain précipité violet sur le fond de la 
préparation, mais en de nombreux endroits il fait défaut ou ne 
gêne pas. 
— On peut obtenir des cils aussi intensément colorés que 
les microbes en utilisant un mordant formé de solution d’alun 
et de tanin à parties égales, ce qui entraîne l’emploi d’une 
solution colorante optima plus riche en cristal-violet (à 1 p. 50 
généralement), mais le fond est souvent encombré de préci- 
pités. 
— Une préparation où les cils sont trop pâles, le fond étant 
resté propre, peut être renforcée par virage au brun noir dans 
