254 
ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
corps : la tyrosine (1), le tryptophane (2) et l’histidine (3). Ainsi 
que je Fai indiqué plus haut, j’ai eu l’oscasion de m’occuper 
du tryptophane; dans le présent travail, je me suis proposé 
d’étudier le dosage colorimétrique de la tyrosine. 
La méthode colorimétrique proposée en 1912 par Folin et 
Denis repose sur Femploi d'un réactif particulier, formé d’un 
mélange d'acides phosphotungstique et phosphomolybdique (4) . 
Leur mode opératoire est le suivant : 
On pèse exactement une quantité déterminée de protéique séché — 1 gr. 
par exemple — et on procède à l’hydrolyse dans un ballon de 500 cent, cubes 
environ en chauffant au réfrigérant ascendant avec 25 cent, cubes d'acide 
chlorhydrique à 20 p. 100 pendant douze heures. On verse alors dans une 
fiole jaugée de 100 cent, cubes et on complète le volume avec de l’eau. 
Pour le dosage, on prélève exactement 1 ou 2 cent, cubes de cette dilution 
que l’on verse dans une fiole de 100 cent, cubes avec 5 cent, cubes du réactif 
dè Folin et Denis. Après cinq minutes de contact, on ajoute 25 cent, cubes 
de solution saturée de carbonate de sodium, on m Mange et on amène à 
100 cent, cubes. Après dix minutes, on compare au colorimètre Duboscq 
avec une solution type préparée en même temps que la première au moyen 
d’une solution de tyrosine pure (dont on emploie, par exemple, 5 cent, cubes 
correspondant à 1 milligramme de tyrosine). 
Cette méthode semble a priori simple et d'une exécution 
facile. En raison des applications multiples faites par les 
auteurs de la réaction sur laquelle elle s’appuie, on est en droit 
de se demander quel degré d’exactitude elle présente. D’ores et 
déjà, un fait attire l’attention : tous les chiffres trouvés par 
Folin et Denis eux-mêmes sont plus élevés que ceux qui ont 
été indiqués par les divers auteurs et déterminés par la 
méthode gravimétrique. Les différences vont de 35 à plus de 
200 p. 100. Bien que un certain nombre des anciennes déter- 
minations soient sujettes à caution en raison du fait signalé 
par Abderhalden et Fuchs (5), que la tyrosine peut contracter 
(1) Folin et Denis, Tyrosine in Proteins as determined by a new colori- 
métrie Method., Journ. of. Biol. Chem ., 1912, 12, p. 245. 
(2) P. Thomas ( loc . cit.) et Ces Annales, 1920, 34. p. 701. 
(3) Weiss et Ssobolew, Ueber ein colorimetrisches Verfahren zur quantita- 
tiven Bestimmung des Histidins, Bioch. Zeils., 1913, 58, p. 119. 
(4) Folin et Denis, loc. cil. Le réactif s'obtient en faisant dissoudre dans 
750 cent, cubes d’eau 100 grammes de tungstate de sodium, 20 grammes 
d'acide phosphomolybdique et 50 cent, cubes d'acide phosphorique à 85 p. 100. 
On fait bouillir deux heures à reflux, on refroidit et on complète à un litre. 
(5) Abderhalden et Fuchs, Ueber den Gehalt der Proteine an l-Tyrosin und 
'die Genauigkeit der Bestimmung der Aminosaure. Zeils. physiol. Chemie., 1913, 
83, p. 468. 
