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ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR 
première ligne? Les avantages de cette manière de faire sont 
évidents : rapidité d’exécution tout d’abord, commodité ensuite 
et facilité de détermination avec une petite quantité de sub- 
stance convenablement purifiée. 
Il ne nous reste plus qu’à préciser les conditions dans les- 
quelles on peut employer le réactif de Millon pour la mesure 
de l’indice phénolique des protéiques, tel qu’il a été défini 
plus haut. 
Il fallait d’abord s’assurer que la coloration obtenue avec des 
solutions de richesse variable est d’une intensité proportion- 
nelle à la quantité du phénol présent. Or, on constate facile- 
ment que si on chauffe le réactif de Millon préparé à la manière 
ordinaire, c’est-à-dire en suivant les indications du mémoire 
de Millon, avec une solution d’un phénol, la teinte varie avec 
l’intensité et la durée du chauffage. C’est ainsi qu’avec une 
solution de phénol ordinaire à 1/10.000 dont on emploie 
10 cent, cubes pour 2 cent, cubes de réactif, si on exprime 
par 1 l’intensité de la coloration obtenue à la température 
de 30°, on n’a plus qu’une intensité moitié (exactement 0,45) 
si on chauffe à 100°. 
Il est donc préférable d’opérer à la température ordinaire, 
entre 17° et 25° (1). Dans ces conditions, la proportionnalité est 
très convenable, si on reste entre des limites de concentration 
bien choisies : de 1/5.000 à 1/20.000 pour le phénol, entre 
1/5.000 et 1/25.000 pour le p. crésol, au-dessous de 1/1.000 
pour la tyrosine. 
Des essais faits avec des concentrations variables en acide 
sulfurique (l’hydrolyse chlorhydrique est à rejeter parce qu’elle 
nécessiterait l’élimination rigoureuse de l’acide chlorhydrique 
avant l’addition du réactif de Millon) montrent qu’il est suffi- 
sant de traiter les protéiques par l’acide sulfurique à 25 p. 100 
en poids, en faisant bouillir dix à douze heures. Le liquide 
(1) Bien entendu, la coloration apparaît d’autant moins vite que la tempé- 
rature est plus basse, mais, en général, la réaction de Millon faite à froid est 
préférable si l’on n’est pas pressé. Elle est toujours plus nette et plus 
intense. 
