PRODUCTION DE LA TOXINE DIPHTÉRIQUE 537 
tralisée, portée à la température de 100°, puis filtrée sur une chausse en 
étoffe. , 
Le liquide filtré est maintenu à une température de 70-80° pour l’alcalini- 
sation avec une solution de soude. On alcalinise, avec la phénolphtaléine 
comme indicateur, jusqu’au début du virage; la comparaison avec un tube 
témoin permet de saisir la modification de teinte du milieu dès le début 
du virage au rose. 
Le [bouillon alcalinisé est filtré sur papier Chardin, chauffé à l’âutoclave 
pendant trente minutes à 120°, filtré sur papier ordinaire, réparti dans des 
ballons de Fernbach à la dose de 1.200 cent, cubes par ballon, et chauffé 
trente minutes à 115° pour la stérilisation. 
Avec le milieu Martin ainsi préparé, et ensemencé avec le 
bacille diphtérique Am 8, on obtient une toxine très active ; la 
dose minima qui tue en quatre jours le cobaye de 350 grammes 
reste à peu près constante d’un bout à l’autre de l’année. 
Comme on le verra par les chiffres que nous citons plus loin 
(tableau II I), ces variations soudaines et inexplicables de l’acti- 
vité de la toxine, dont parlent la plupart des auteurs, ne se 
produisent pas à l’Institut Pasteur. 11 semblerait que depuis 
les travaux de Spronck, de Th. Smith [5], de L. Martin, sur 
l’influence nocive des sucres de la viande, qu’il faut faire 
disparaître par une fermentation appropriée, elles ne devraient 
plus être observées. Nous voyons cependant qu’elles préoc- 
cupent non seulement Madsen [6] en 1898 et 1908, mais Mac 
Conkey 7] à l’Institut Lister en 1912, Bunker [8] en Amérique 
en 1919, Dernby et Davide [ 9 j à l’Institut sérothérapique de 
Suède en 1921 ; et dans la récente publication (1921) de 
l’Institut de Thérapeutique expérimentale de Francfort sur le 
contrôle officiel des sérums, dont cet Institut est chargé, Otto 
et Iletsch [10] disent encore que, sur une série de ballons mis 
en culture en même temps, une partie sera inutilisable pour 
la préparation de la toxine-étalon, parce que l’activité du 
poison restera trop faible. 
Cherchant la cause de ces irrégularités, Madsen avait étudié 
dès 1898 l’influence de la réaction initiale du milieu de culture. 
Il désignait le titre de ses bouillons par le nombre de centi- 
mètres cubes de soude normale qu’il fallait ajouter par litre 
pour arriver au virage de la phénolphtaléine; et il obtenait ce 
résultat surprenant que lorsque le tilre initial était 18,5 à 20,5, 
