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ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
Toxine + 2 c.c. eau distillée 8,65 
ajustée à P+ = 7 8,3 
— — = 6,5 7,3 
— — =6 6,3 
Une série d’essais montrait ensuite que la toxine dont le 
PJ au onzième jour est régulièrement 8,45 à 8,55 passe à 8,7 
après quatre ou cinq jours de séjour à la glacière, et généra- 
lement à 9 après vingt-quatre heures seulement à l’étuve. En 
même temps le séjour à l’étuve, sans addition de réactifs 
destinés à modifier le Pi, c’est-à-dire en somme à la réaction 
Pi = 9, atténue immédiatement la toxine dans de fortes pro- 
portions, la dose mortelle tombe en moyenne de 1/700 à 1/200. 
C est évidemment à l’existence de GO 2 libre, et de bicarbonate, 
qu’il faut attribuer ces variations de P£. Lorsqu’on ajoute de 
l’acide chlorhydrique, on décompose les bicarbonates et l’acide 
carbonique, auquel les indicateurs colorés de la série de Clark 
et Lubs sont très sensibles, ne s’échappe que lentement du 
milieu. Nous avons donc cherché à déterminer les quantités 
d’acide à ajouter pour obtenir un PJ donné, en chassant au fur 
et à mesure CO 2 par ébullilion dans le vide. L'opération a 
l'allure suivante. On part de 25 ou 30 cent, cubes de toxine, 
ajuste à un P+, chasse CO 3 , prélève 5 cent, cubes pour vérifier 
la réaction obtenue et calcule par un nouveau titrage l’acide à 
ajouter, chasse à nouveau CO 2 après cette addition, etc... 
Exemple pour 5 cent, cubes. 
II cl cl jouté 
P + 
ii 
p + 
1 H 
\ . 
1 
c.c. 25 N/10. , . 
7 
\ Chassé CO 2 . 7,3 
2. 
0 
c.c. 35 
6,8 i 
I — v .... 7,15 
3. 
() 
6,8 
— 6,95 
4. 
0 
c.c. 15 
6,8 \ 
i — 6,9 
5. 
0 
c. C. ! 
6,8 y 
— 6,8 
On voit qu’il a fallu cinq additions successives d’acide pour 
arriver à une réaction stable, en apparence encore. En effet, 
nous ajoutons à 20 cent, cubes de ioxine la quantité totale 
d’acide déterminée par les essais successifs ; nous relions à 
une trompe qui ne laisse subsister qu'une pression de 10 à 
15 millimètres de mercure, pendant quinze minutes, en plon- 
geant le ballon dans un bain-marie à 35° dès que le dégagement 
