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ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
délai susdit, s’ est maintenu le trouble sans aucun pigment 
avec des germes qui n’ont montré que vert fluorescent ou 
absence de pigment dans le bouillon. Il reste incertain s’il s’agit 
de représentants de l'espèce pyocyanique de la variété O ou de 
quelqu’un des nombreux microbes qui sont fluorescents ou sans 
pigment dans le bouillon et incolores dans la peptone. L'essai 
sur gélose-peptone glycérinée peut seul décider. 
Gélose-peptone glycérinée. 
Le troisième milieu n’a d’emploi que dans le cas, en somme 
assez rare, où la notion d’espèce n’est pas résolue par les essais 
en bouillon et en eau peptonée. Il est fait de cette même eau 
peptonée, seulement glycérinée et par addition de gélose 
amenée à la consistance solide sur plan incliné (1), toutes condi- 
tions propres à faire produire de la pyocyanine par tous les 
germes pyocyaniques, de quelque variété et race qu’ils soient, 
quoiqu’ils aient produit par conséquent dans les autres 
milieux. Ce serait donc le milieu à expérimenter d'abord, abs- 
traction faite de tout autre, s'il ne s’agissait que d’établir la 
nature pyocyanique des seize types de germes qui se peuvent 
rencontrer (2). Dans le rang assigné ici à son emploi, après 
(1) Je reproduirai ici la formule et le mode de préparation si avantageux 
que j’applique depuis trente ans, à la légère modification près que, dans ces 
tout derniers temps, j’ai apportée au titre de la gélose. Cette gélose est 
divisée aux ciseaux en menus tronçons d’environ 6 millimètres de long. Op en 
prend un poids calculé sur le nombre de tubes à préparer, à raison de 
0 gr. 20 par tube; on en lait, à vue d’œil, le partage en doses de 0 gr. 20. 
Chaque tube reçoit une dose, plus V gouttes de glycérine, plus 5 cent, cubes 
d'eau peptonée à 2 p. 100, neutralisée comme il convient, mais sans le souci 
d’en précipiter dès là et d’en séparer les sels, qui ne seront pas une gêne. 
Les tubes sont alors maintenus au bain-marie bouillant pendant une 
demi-heure; puis portés à l’autoclave à 120° pendant quinze minutes. Ils sont 
ensuite mis à refroidir inclinés. C’est, comme on voit, dans le moindre 
temps et avec le moins d’embarras par la suppression de toute filtration, de 
toute manipulation de produit visqueux, et de la température qui y est 
nécessaire, grâce aussi au minimum de chauffe, la réalisation du milieu le 
moins coloré, partant le mieux approprié encore qu’un peu trouble, s’agissant 
non de dénombrer et d’analyser des colonies dans sa masse, mais de faire 
ressortir sur son opalescence grise une couleur uniformément répartie en 
surface. Pour cela l’ensemencement est fait de III gouttes de culture 
liquide, bouillon ou peptone, qui sont étalées régulièrement à la baguette de 
platine ou de verre. 
(2) Treize de ces types sont de fait acquis (Races de la variété pyocyano- 
gène, ces Annales , t, 5, 1891, p. 65; races de la mélanogène, ces Annales , 
t. 5, 1901, p. 826; races de l’érythrogène, ces Annales , t. 33, 1919, p. 259; races 
