510 
ANNALES DE L’ institut pasteur 
A allée) utilisé à 1 Institut Pasteur pour la préparation de la 
tuberculine. Les éléments microbiens sont tués par chauffage 
a 110 et débarrassés à la main des débris de filtre en papier 
restés adhérents à la suite des opérations antérieures de filtra- 
tion et d’essorage. On les délaye dans de l’eau glacée en ayant 
soin de triturer jusqu à disparition des amas grumeleux dont 
le lavage se fait plus difficilement et on les passe à travers un 
tamis a larges mailles pour bien les diviser. On verse alors ie 
magma liquide sur un filtre et on continue l’affusion d’eau 
glacée jusqu à ce que 1 eau de lavage soit incolore et ne donne 
Plus de précipité par le réactif de Tanret. Ce mode opératoire 
est préférable au lavage au filtre de porcelaine de Buchner. 
Les bacilles ainsi traités sont séchés à l’étuve à 37°. Après 
dessiccation, ils sont pulvérisés et privés des derniers débris 
de filtres qui auraient pu échapper précédemment. Cette pulvé- 
risation est bien 1 opération la plus pénible qui existe, elle est 
pourtant indispensable si l’on veut obtenir des bacilles complè- 
tement dégraissés (1). On les introduit alors dans un ballon 
avec une grande quantité de chloroforme et on chauffe au bain- 
marie en maintenant l'ébullition pendant une heure ou deux 
pour ce premier épuisement; on laisse refroidir, et on filtre 
ensuite à la trompe, sur entonnoir de Buchner. Le gâteau de 
bacilles aggloméiés est détaché tandis qu il est encore en masse 
compacte et légèrement humide. L’épuisement chloroformique 
est renouvelé plusieurs fois. Suivant la quantité de bacilles et 
de chloroforme employés, il faut compter de 6 à 8 épuisements 
pour obtenir un chloroforme incolore et une masse bacillaire 
complètement blanche. 
Quantité de substances solubles dans le chloroforme. La 
quantité de substances dissoutes ainsi par le chloroforme est 
énorme et atteint près de 40 p. 100 du poids des bacilles secs 
mis en œuvre. 
Dans une opération préliminaire, 165 grammes de bacilles 
secs ont donné 65 grammes de substances solubles dans le 
chloroforme, soit 38,18 p. 100, et dans une seconde opération, 
1.180 grammes de bacilles secs ont fourni 450 grammes soit 
1) Elle n est pas nécessaire si l’on se propose 
(I une certaine quantité de matière grasse. 
uniquement l'extraction 
