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ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
limites de titrage. Nous examinerons rapidement ces divers 
procédés. 
1° Méthode par isolement en nature. — Elle a été employée 
par Hopkins et Cole (1) qui ont utilisé la digestion trypsique 
pour détacher le tryptophane de la molécule protéique, puis 
1 ont séparé par précipitation au moyen du sulfate mercurique 
en milieu acidifié par l’acide sulfurique. Après lavage du pré- 
cipité, on le décompose au moyen de l’hydrogène sulfuré, puis 
on recommence encore une fois ce traitement. La solution 
obtenue est concentrée jusqu’à cristallisation; finalement, on 
seche et on peut peser. Hopkins et Cole ont ainsi retiré directe- 
ment de la caséine 1,5 p. 100 de son poids de tryptophane. Ce 
résultat, que les auteurs indiquent comme un minimum en 
raison des pertes inévitables, est à retenir. 
Cette méthode est celle qui donne les résultats les plus cer- 
tains ; elle exige naturellement une quantité importante de 
matière protéique, ce qui la rend inapplicable dans beaucoup 
de cas. 
2" Méthode par transformation en indol et dosage de ce corps. 
— On a songé à décomposer le tryptophane et à doser l’indol 
produit. Ainsi, W. von Moraczewski (2) provoque la putréfaction 
de divers albuminoïdes, après les avoir soumis à la digestion 
pepsique et trypsique. L’indol lormé est séparé par distillation 
et dosé. Mais les chillres obtenus montrent que le calcul du 
tryptophane, basé sur ces dosages d’indol, ne peut donner 
aucun résultat constant. 
3 Méthode de titrage basée sur l emploi d’une réaction colo- 
rée. — Le tryptophane en solution pas trop étendue donne 
avec 1 eau de brome une coloration rouge violacé. Cette réac- 
tion a été d’abord utilisée par Levene et Rouiller (3), en 1907, 
pour le dosage volumétrique, au moyen d’une solution titrée 
d’eau de brome. La fin du titrage était indiquée par le virage 
de la coloration du rouge violet au jaune, ce qui correspond à 
la transformation du mélange de tryptophane monohromé et 
dibromé en combinaison dibromée. 
On peut reprocher à ce dosage son manque de précision. 
(1) F. G. Hopkins et S. Cole. Journ. of PhysioL , 1901, 27. p. 418 
(2) \\. von Moraczewski. Bloch. Zeilsch ., 1913, 51. p. 340. 
(3) P. Levene et C. Rouiller. Journ. of. Biol. Chem., 1907, 2, p. 481. 
