3 
použité bylo 20 ccm, vyplývá, že při Eijkmannově zkoušce k pomnožení 
nestačí 1 jedinec bact. coli, jako při zkoušce Pariettiově, nýbrž že jedinců 
bact. coli v kvantu ku vyšetřování vzatém musí býti větší počet, má-li 
nastati pomnožení. 
Při dalších pokusech bylo použito ku oddělení sraženiny elektrické 
centrifugy (podobně jako v pokusech Fickerových při průkazu bacillů 
tyfových ve vodě). 
Dalo se očekávati, že při použití této pomůcky bude možno dle 
okolnosti pi acováti s pomei ne menším množstvím vody, což by ovšem 
bylo nemalou výhodou pro methodu srážecí. Pro úsporu ve vážení a měření 
ukázalo se výhodnějším uživati rourek centrifugálních s dělením přesně 
na 40, 20 10 a 5 ccm obsahu, a dále větší počet sterilních pipettek na 
1 ccm obsahu s dělením na desetiny. 
Prvním úkolem , k jehož řešení se přikročilo , bylo zjistiti, zda jest možno 
přímo srážením a hned následujícím centrifugováním převésti z určitého 
množství vody véťsinu zárodků bact. coli do sedliny. 
K tomu účelu provedeny byly tyto dva předběžné pokusy: Do 
4 baněk odměřeno po 50 ccm fysiologického roztoku a na to byly baňky 
v parním kotli vysterilisovány. Do I baňky bylo přeneseno očko 24hodinné 
agarové kultury b. coli a po dokonalém rozetření a protřepání přenesen 
byl z této suspense sterilní pipetou 1 cm 3 do II. baňky, z té pak zase 1 cm 3 
do III. a z té 1 cw 3 do IV. baňky. Ze čtvrtého zředění odměřena přesně 
0-10 cm 3 a 0-05 cm 3 do misky Petriho a vylity byly plotny gelatinové ku 
zjištění počtu zárodků, jež byly vzaty do práce. K vůli dosažení stejných 
výsledků počítány zárodky vyrostlé na plotnách gelatinových za 3 dni. 
Zároveň bylo přeneseno totéž množství, a sice 0-10 a 0-05 cw 3 , do 2 steril¬ 
ních rourek k centrifugování, naplněných 10 cw 3 fysiologického roztoku. 
Do každé rourky přidáno po 8 kapkách sterilního 10 % roztoku sody a po 
4 kapkách 10% sterilního síranu železitého, načež po mírném protřepání 
vloženy ihned do centrifugy a 10 minut centrifugovány. Na to byly rourky 
z centrifugy vyjmuty, čirá tekutina nechala se úplně odkapati a na dně 
pevně usazená sraženina byla rozpuštěna asi ve 4 kapkách 20% sterilního 
roztoku vinanu draselnatého. 
Aby bylo umožněno přenésti tento roztok kvantitativně na plotny Dri- 
galski-Conradiho, bylo postupováno následujícím způsobem'. Nejprve byl 
roztok sterilní pipetou dobře promíchán, načež přenesen touž pipetou 
kvantitativně na určitý počet ploten Drigalskiho; podle toho jaké asi 
množství zárodků bylo vzato do práce. Aby se pokud možno vyhnulo 
ztrátám, byla každá rourka i s pipetou postupně promyta několika kap¬ 
kami vinanu draselnatého, který pak touže pipetou přenesen na novou 
plotnu Drigalskiho. Pomocí sterilní špachtičky byla pak rozpuštěná 
sraženina stejnoměrně na povrchu ploten rozetřena, a sice postupně z jedné 
do druhé a konečně, aby se předešlo ztrátám zárodků lpících na špachtličce 
byla tato dokonale otřena na nové plotně Drigalskiho. 
l * 
X. 
