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JOURNAL DE MICROGRAPHIE. 
par le verre mince du couvre-objets qui l’isole dans une petite quantité 
d’air, sont utiles et convenables pour certains résultats, spécialement 
pour l’étude suivie des phases successives du développement biolo¬ 
gique des Bactéries. Mais la méthode de Pasteur — culture en grand 
dans un liquide stérilisé renfermé dans un ballon de verre — oôre de 
grands avantages, sous le rapport de l’isolement, de la conserva¬ 
tion et de la culture des formes spéciales, et de l’exclusion des 
germes atmosphériques ; elle donne aussi, en raison de la quantité 
considérable de liquide en expérience, des matériaux propres aux ex¬ 
périences physiologiques, injections chez les animaux, etc. 
La méthode que j’ai trouvée préférable, après un nombre con¬ 
sidérable d’expériences faites à l’aide d’appareils de formes variées, 
est une modification de celle de Pasteur. Les flacons de culture sont 
faits de tubes de verre d’environ 1/4 de pouce de diamètre. 
J’ai trouvé plus commode de faire de nouveaux tubes que de nettoyer 
les anciens; je jette ceux-ci lorsqu’ils ne me servent plus. Après 
avoir soufflé le fond, l’extrémité opposée est étirée en tube capillaire 
et hermétiquement fermée dans la flamme de la lampe d’émailleur. 
Dans ces conditions, le flacon qui a été stérilisé par la chaleur, se 
conserve indéfiniment, à l’abri de toute contamination du fait des 
germes atmosphériques. 
Pour introduire un liquide, on brise l’extrémité du tube capil¬ 
laire, on chauffe légèrement la partie renflée et on plonge l’ouverture 
au-dessous de la surface du liquide. 
J’ai trouvé préférable de ne pas s’assurer de la stérilisation du liquide 
de culture avant son introduction dans les flacons, et j’ai l’habitude 
d’en remplir à la fois un nombre considérable avec du bouillon 
de poulet filtré, du liquide de Cohn, une infusion de foin ou tout 
autre liquide de culture dont on veut faire usage. Après avoir refermé 
hermétiquement l’extrémité capillaire des tubes, la stérilisation du li¬ 
quide contenu est obtenue par la chaleur. 
Ceci se fait en plaçant les flacons dans un bain d’huile, de paraffine ' 
fondue ou d’une solution saline concentrée et en le maintenant à une 
température d’environ 105 degrés centigrades pendant une heure et 
plus. Quelquefois, un flacon à renflement exceptionnellement mince 
se brise, et l’opérateur doit prendre garde que l’huile bouillante ne lui 
saute à la figure par suite de cet accident. Ceci rend peut-être dési¬ 
rable de trouver un bain ayant un point fixe d’ébullition pas trop élevé 
et que par suite, on n’ait pas besoin de surveiller. J’ai reconnu qu’une 
solution saline concentrée remplissait bien ce but. Les flacons sont 
alors lavés pour enlever la solution saline qui a pu s’attacher à leur 
surface, puis placés dans un four de culture, maintenu à une tempéra¬ 
ture de 36 à 38 degrés centigrades pendant trois ou quatre jours, pour 
vérifier le succès de la précédente opération, — la stérilisation. Si le 
