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JOURNAL DE MICROGRAPHIE. 
de ces impuretés. En faisant produire aux bactéries d’une première culture une 
série de générations au moyen d’ensemencements successifs, sur de nouveaux 
milieux, on doit obtenir finalement une culture pure , dans laquelle l’espèce 
destinée à l’inoculation se trouvera isolée et débarrassée de toute matière étrangère. 
L’orateur décrit la méthode générale que l’illustre chimiste Pasteur a le premier 
employée pour la culture artifîcelle des m.icrp-organismes dans des liquides nutritifs. 
Il insiste sur les précautions minutieuses qui sont nécessaires pour stériliser 
sûrement les vases , les instruments et les liquides servant à cette culture , et pour 
empêcher leur contamination par des germes venus du dehors. 
Il passe ensuite en revue les nombreuses modifications et les perfectionnements 
divers qui ont été apportés à ces procédés , afin de donner plus de sécurité à leurs 
résultats. Il fait connaître les ingénieuses méthodes de Pasteur et de Lister, pour 
obtenir l’isolement d’une espèce déterminée , méthodes connues en Allemagne sous 
les noms de méthode des cultures fractionnées ~ fractionirte Culturen " — 
de Klebs , méthode de dilution des liquides bactérifères — « Yerdünnungs-Méthode « 
— de Nægeliet Buchner, etc. 
Quoiqu’il ne doute pas que ces différents procédés n’aient donné, dans des mains 
habiles, des résultats généraux dont l’exactitude ne peut être mise en doute,, il 
croit, avec Koch, que les cultures dans des liquides, quand elles doivent passer par 
une suite de générations plus ou moins considérable , ne sauraient être préservées 
sûrement de l’introduction de germes dont l’ubiquité est bien démontrée. Or, le 
principal reproche qu’on puisse adresser à ce mode de culture , c’est qu’il ne permet 
pas de reconnaître avec certitude si une contamination par des organismes étrangers 
s’est produite dans le cours des expériences. 
Certains signes indiquent bien à l’œil nu qu’une adultération a eu lieu , mais 
l’absence de ces signes ne prouve pas que la culture soit restée pure. L’examen 
microscopique lui-même est insuffisant dans beaucoup de cas pour s’en assurer : la 
goutte puisée dans le liquide peut ne pas renfermer d’organismes suspects et, ce qui 
est plus grave, ces organismes peuvent ne pas se distinguer au microscope de ceux 
dont on veut étudier l’action pathogénique. En outre, l’épreuve microscopique 
oblige à recourir à des manœuvres qui sont très menaçantes pour la conservation 
des cultures, et rendent cette conservation à peu près irréalisable, quand elles sont 
souvent répétées. 
D'après le D^' Koch , les cultures dans les liquides exposent donc inévitablement à 
ces graves inconvénients et, malgré toutes les précautions, on ne serait parvenu 
jusqu’ici qu’à éviter les causes d’erreur les plus grossières que cette méthode apporte 
avec elle. 
L’orateur montre ensuite que si l’on réduit considérablement la masse du liquide 
nourricier, de manière à pouvoir a tout moment l’inspecter sous le microscope , il 
devient possible de constater l’introduction de germes étrangers et de rejeter les 
cultures contaminées. Cette méthode qui consiste essentiellement à cultiver les 
bactéries dans des chambres humides et closes, placées sous le microscope, a 
donné quelques bons résultats , notamment pour la culture du Bacillus anthracis. 
Mais elle est impraticable pour les petites espèces , qui ne peuvent être reconnues 
sans préparation préalable au moyen de réactifs colorants, etc... , et elle ne réussit 
pas dans beaucoup de cas , à cause des conditions défavorables de développement 
dans lesquelles les organismes sont placés. 
Koch, en cherchant un moyen qui permette d’obtenir les organismes pathogènes 
a l’état de culture pime et qui présente des garanties d’exactitude absolue , adopta , 
il y aura bientôt trois ans , une méthode dont le principe est différent, et dont la 
valeur expérimentale a déjà été démontrée par plus d’une brillante découverte. 
Cette méthode se distingue de toutes les autres méthodes de culture dans des 
liquides nutritifs par l’emploi d’une su.bstance solide — « feste Nahrboden Culturen >» 
