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JOURNAL DE MICROGRAPHIE. 
MÉTHODES DE FRENZEL ET DE THRELFALL 
POUR LA FIXATION DES COUPES SUR LE PORTE-OBJET. 
Méthode de Frenzel. — Le D'" Frenzel est Fauteur d’une méthode de fixation 
des coupes sur le porte objet {Zoolog. Anzeiger, n° 130, 1883) qui permet de 
colorer celles-ci après fixation. On se sert d’une solution de gutta-percha dans le 
chloroforme et la benzine, solution qu’on filtre jusqu’à ce qu’elle soit claire et pres- 
qu’incolore et qui doit être assez peu épaisse pour couler librement sur le slide. On 
en*prend avec un pinceau une goutte qu’on laisse sécher, puis on place les coupes. 
Si l’objet a été inclus dans la "paraffine ou dans un mélange de paraffine, (par 
exemple, 4 parties de paraffine pour 1 de vaseline), on brosse les coupes avec un 
pinceau humide d’alcool et on les expose à une température de 35° à 50° G pendant 
5 à 10 minutes , afin que la gutta-percha devienne visqueuse. On les laisse alors à 
l’air pendant 5 minutes, puis on les place dans un vase contenant de l’alcool absolu 
chauffé à 45° — 50° G pour enlever la paraffine. Il faut de 5 à 15 minutes pour dis¬ 
soudre la paraffine et employer une grande quantité d’alcool, qui est un faible dissol¬ 
vant de la paraffine. L’alcool saturé de ce corps peut être filtré après refroidissement 
et servir de nouveau. Quand la parafine est complètement dissoute , on plonge les 
coupes dans l’alcool à 70 p. 100, puis dans des alcools de plus en plus faibles , puis 
dans l’eau. On peut alors les colorer. Après quoi, on les lave et on les chauftè dans 
l’alcool absolu et l’on peut achever le montage dans l’essence de girofles ou dans le 
baume. 
Si l’objet est inclus dans la celloïdine , comme on le fait souvent maintenant, on 
peut brosser les coupes avec de la benzine ou du chloroforme qui ramollissent la 
gutta-percha et permettent la fixation des coupes. Quand celles-ci sont sèches , on 
peut les colorer, puis on les lave et on les transporte dans l’alcool absolu. L’es¬ 
sence de girofles employée avant le baume dissout la celloïdine. 
Méthode de Threlfall. — M. Threlfall [Zool. Anzeig^ n° 140, 1883) a indiqué une 
méthode de fixation des coupes que l’on donne comme meilleure que la précédente. 
On emploie une solution légère de caoutchouc dans la benzine ou le chloroforme 
que l’on répand sur le slide de manière à y laisser une couche, comme on fait du 
collodion sur une plaque photographique. Quand la' couche est sèche , on dispose 
les coupes et on élève la température jusqu’au point de fusion de la paraffine. Les 
'coupes tombent alors dans la couche de caoutchouc assez ramolli pour les faire 
adhérer. On laisse refroidir le slide et on le traite par l’huile de naphte ou quel- 
qu’huile de paraffine légère dont Faction dissolvante est d’autant plus rapide que 
son point d’ébullition est moins élevé. » 
L’alcool absolu se mélange facilement au naphte ou aux huiles légères de paraf¬ 
fine , de sorte que le dissolvant est rapidement enlevé. On peut alors pUicer le 
slide dans des alcools de plus en plus faibles , colorer et reporter dans l’alcool 
absolu. On éclaircit avec la créosote ou l’essence de girofles et on monte dans le baume. 
Si l’on ne colore pas , on peut monter les coupes dans le baume au sortir de 
l’huile de naphte. 
PRÉPARATION DU BACILLUS TUBERCULOSIS 
{Méthode d'Ehrlich modifiée par Gibbes). 
N° 1. (a) Gristaux de rouge Magenta. 2 gr. 
{b) Aniline pure. 3 » 
(c) Alcool densité 0,880. 20 » 
(d) Eau distillée. 20 
