JOURNAL DE MICROGRAPHIE. 
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COLORANT BLEU. 
Bleu de Prusse soluble , 1 gramme ; 
acide oxalique, 0.25 centigrammes. Laisser 
agir quelques heures avec très peu d’eau 
et ajouter : 
Eau pure , 100 grammes. Filtrer. 
COLORANT ROUGE. 
Dissoudre 0.50 centigrammes d’alun 
dans 10 grammes d’eau et y ajouter : 
0.50 centigramme de safranine dissoute 
dans 10 grammes d’alcool pur. Filtrer. 
L’objet que l’on voudra préparer pour l’étude sera , selon sa nature, trié , désa¬ 
grégé, ou coupé au microtome en tranches très minces. — On le lave à l’eau distillée 
avant de le tremper dans le liquide bleu , où on le laissera 5 à 10 minutes suivant la 
consistance plus ou moins molle de l’objet ou le plus ou moins d’épaisseur de la 
coupe. Lorsque l’action de ce colorant a donné une teinte bleue suffisante, il faut 
laver à grande eau , prenant pour cela de l’eau distillée ou de l’eau bouillie et filtrée 
( donc sans calcaire ), ceci afin d’éviter la formation de granulations d’oxalate de 
chaux. Sans cette précaution il y aurait formation de ce sel en cristaux très ténus 
et pulvérulents qui resteraient adhérents au tissu organique et gâteraient la netteté 
visuelle au microscope. 
L’objet est ensuite plongé dans la solution de safranine alunée qu’on laisse agir 
pendant un temps qui variera (pour les raisons déjà citées) de 5 à 10 minutes. Ce 
colorant opère une sélection spéciale et n’agit pas sur les détails de structure déjà 
teintés en bleu. Le lavage se fait à l’alcool faible. La double coloration est dès lors 
achevée et l’étude microscopique peut se faire immédiatement en prenant, soit de 
l 'eau, soit de la glycérine comme medium. 
Mais si l’on veut conserver et monter ces objets colorés sous la forme de prépara¬ 
tions microscopiques, il faut alors les laver d’abord avec de l’alcool faible, puis avec 
de l’alcool absolu afin d’enlever les moindres traces d’eau qui rendraient la prépa¬ 
ration plus ou moins trouble ou laiteuse. Une fois cet alcool écoulé, on ajoute de 
l’essence de girofle (peu colorée). Cette essence doit être ajoutée avant que tout 
l’alcool soit évaporé et, si c’est une coupe, il ne faut pas la laisser sécher, car de 
petites bulles d’air pourraient alors s’introduire dans l’intérieur des cellules et il 
serait difficile de les en déloger. 
Quand on opère sur des bactéries ou autres algues et champignons microsco¬ 
piques, on agit par décantations successives, mais pour les coupes végétales ou 
animales, toutes ces opérations peuvent se faire commodément sur le slide même, 
en retenant la pièce colorée avec un petit pinceau pendant que, soit le colorant, soit 
l’eau, soit l’alcool s’écoulent. 
Avant de colorer ainsi les vers intestinaux ou les taenias, je les rends transparents 
en les imprégnant d’un mélange d'acide acétique et de glycérine et en les compri¬ 
mant modérément entre deux plaques de verre. Leurs divers organes ( les œufs 
surtout) se distinguent ensuite très nettement dans un milieu diaphane. 
Si l’on désire que les coupes restent fixées sur le slide à une place voulue , il suffit 
d’évaporer préalablement sur ce slide une mince couche de baume de Canada. Sur 
cette couche de baume presque sec, on applique, avec une douce pression, les coupes 
imprégnées d’essence de girofle. Elles y adhèrent immédiatement et fortement , et, 
ni l’addition complémentaire du baume demi-liquide, ni la fixation du cover, ne 
viennent les déplacer. 
Je dois recommander aussi l’emploi du styrax. Il est avantageux parce que son 
indice de réfraction (1,83) est plus élevé que celui du baume (1,52). Or, l’indice 
moyen des substances protéiques, albumineuses et celui des tissus végétaux, est de 
1,35 à 1,40 environ , et plus il y aura de différence entre Vindice de réfraction de 
l'objet , avec celui du medium ou il est plongé, plus l'objet à étudier se verra 
