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JOURNAL DE MICROGRAPHIE. 
rience est concluante. Elle montre à la fois la sensibilité du procédé et la princi¬ 
pale difficulté que rencontre l’observateur qui veut arriver à des résultats d’une 
exactitude absolue. Il faut en effet, préalablement à toute analyse, laver à l’acide 
sulfurique les verres, les baguettes, les porte-objets, etc., dont on se sert, si l’on 
veut n’avoir dans le dépôt à examiner que les organismes existant dans le liquide 
traité par de l’acide osmique (1). 
» En vue de faciliter la lâche de ceux qui voudraient contrôler mes expé¬ 
riences, j’indiquerai succinctement les procèdes techniques auxquels je me suis 
arrêté après de nombreux essais. 
» Pour les eaux potables, filtrées ou non, peu chargées de matières organi¬ 
ques, je fais usage d’une solution d'acide osmique à 1,5 p. 100. D’après mes 
expériences, moins de 1*=*^ de cette solution suffit pour SO^^*^ à 40*^^ d’eau. A celte 
dose tous les organismes microscopiques animaux et végétaux sont rapidement 
tués et fixés dans leurs formes (2). Au bout de quelques minutes, et afin d’atté¬ 
nuer l’action de l’âcide osmique, qui à la longue noircit trop les tissus, on ajoute 
autant d’eau (3) que le permet la dimension de l’éprouvette dont on fait usage. 
» Dans certaines eaux très riches en organismes, l’examen microscopique du 
dépôt peut avoir lieu au bout de quelques heures. Pour les eaux très pures ii faut 
attendre vingt-quatre ou même quarante-huit heures. Dans tous les cas, ce n’est 
qu’après un délai assez long que le liquide doit être décanté avec précaution, 
de manière à ne conserver que le dépôt dans Icc ou 2cc de liquide. A ce moment, 
l’opération est terminée. 
» L’emploi des réactifs colorants présente cependant des avantages que l’on 
ne saurait passer sous silence. Parmi les plus utiles, je citerai le picrocarminale 
de Ranvier, le vert de méthyle, l’éosine, l’hématoxyline, le violet de Paris, sui¬ 
vant la nature des organismes et le but qu’on se propose. S’il ne s’agit que de 
rendre plus facile l’examen micrographique d’organismes très petits et très trans¬ 
parents, le violet de Paris doit être préféré. Même très dilué, ce réactif colore 
fortement les objets. La cellulose des végétaux est colorée en bleu, la matière 
amyloïde en violet rougeâtre ; les cils vibratiles, les flagellum et le protoplasma 
des infusoires prennent une teinte bleu violet. L’excès de la coloration constitue 
même la principale difficulté dans l’emploi de ce réactif. 
» Quel que soit le réactif colorant, il est toujours préférable de l’introduire 
mélangé â la glycérine diluée ; mais il faut prendre des précautions pour que 
l’action de la glycérine soit très lente et n’amène pas le rata finement des tissus. 
Dans ces conditions, l’élection des matières colorantes se fait mieux ; les orga¬ 
nismes restent transparents et, si l’on veut conserver des échantillons, la ^dycérine 
constitue un milieu conservateur et maintient les organismes à fabr, do l’cvapo- 
ration. 
» Il paraît superflu d’insister sur les avantages que l’Histoire naturelle et fHy- 
(1) Les diatomées ne sont cependant pas désorganisées par facide sulfurique. 
(2) Infusoires, flagellés, amibes, rotifères, vibrions, bactéries, monades, spores, algues, 
acariens, annélides, arachnides, etc., etc. L’action toxique et fixatrice de l’acide osmique 
paraît générale. 
(3) Il faut évidemment faire usage d’eau distillée ou de l’eau analysée à l’exclusion d® 
toute autre. 
