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Methoden der Bacterienfärbung. 
Violett färben und zur dritten die, welche beiden Farben leicht zugäng¬ 
lich sind. Eine Vorbehandlung der zu färbenden Schnitte mit concen- 
trirter wässeriger Oxalsäurelösung scheint nur bei den Typhusbacillen 
von wesentlichem Vortheil zu sein; doch begünstigt sie auch die 
Färbung der übrigen Bacterien, mit Ausnahme der Rotzbacillen, deren 
Färbungsvermögen durch die Ansäuerung Schaden erleidet. — Kühne’ s 
Färbungsprocedur gestaltet sich folgendermaassen: In ein Glasschälchen, 
welches zur Hälfte mit einprocentiger wässeriger Lösung von Ammonium 
carbonicum gefüllt ist, filtrirt man so lange concentrirte wässerige Me¬ 
thylenblaulösung hinzu, bis ein Tröpfchen auf Fliesspapier einen intensiv 
dunkelblauen Fleck hinterlässt. In diese Farbstofflösung bringt man 
10 bis 12 in Alkohol entwässerte Schnitte für 10 bis 15 Minuten, spült 
sie danach in Wasser ab und exponirt sie hierauf einzeln je nach ihrer 
Dicke einer Salzsäure von 1 : 500 bis 1000. Bei sehr feinen Schnitten 
erreicht man bereits innerhalb 2 bis 3 Secunden die gewünschte Diffe- 
renzirung, deren Eintreten man an dem Hellblauwerden der Schnitte 
erkennt. Der lichtblau gewordene Schnitt wird nun in mindestens drei 
Schalen Wasser von der Säure befreit, wobei zu beachten ist, dass im 
Wasser noch ein Theil der Farbe abgegeben wird. In derselben Weise 
behandelt man nach einander die übrigen Schnitte. Schliesslich fängt 
man jeden einzelnen Schnitt mittels eines Deckgläschens, welches durch 
eine nach der Fläche gebogene Pincette gehalten wird, so auf, dass er 
sich auf demselben faltenlos ausbreitet, lässt das überschüssige Wasser 
auf Fliesspapier ablaufen und macht den Schnitt lufttrocken, indem man 
mittels eines kleinen Ballongebläses, welches mit einem zur Spitze aus¬ 
gezogenen Glasröhrchen versehen ist, einen senkrechten Luftstrom auf 
denselben richtet. Bei einiger Uebung gelingt es, den Schnitt hierdurch 
zugleich sehr fest an das Deckgläschen anzukleben. Der letzte Wasser¬ 
rest wird durch leichtes Erwärmen auf einer polirten Glasplatte be¬ 
seitigt, welche Procedur man zweckmässig so lange verschiebt, bis alle 
Schnitte dazu vorbereitet sind. Nach vollkommener Trocknung: Xylol, 
dann Balsam. Der beschriebenen Methode des Antrocknens ist das Ent¬ 
wässerungsverfahren durch Alkohol vorzuziehen, wenn es nicht allein 
auf den Nachweis der Bacterien sondern auch auf deren Verhalten zu 
den Gewebsbestandtheilen ankommt; man entwässert in diesem Falle in 
absolutem Alkohol, welchem (falls keine weitere Entfärbung erwünscht 
ist) Methylenblaualkohol zugesetzt wird, hellt den entwässerten Schnitt 
in Tereben oder Thymen auf und entölt in Xylol. 
Da sich, wie bemerkt, nicht alle Bacterien durch das Methylenblau- 
Verfahren im Gewebe färben lassen, so muss diesem falls das Resultat der 
Untersuchung auf Bacterien an den Methylenblau-Präparaten negativ aus¬ 
fiel, das Krystallviolett-Verfahren angeschlossen werden. Letzteres besteht 
in der folgendermaassen durch Kühne modificirten GRAM’schen Färbung : 
