474 Präparation des Blutserums zu Platten - Culturen. 
deren jeder genau 1 cc Cylinderinhalt entspricht. Vor der Füllung des 
Cylinders entfernt man den Stöpsel, bohrt den Cylinder bis zu ent¬ 
sprechender Tiefe in die Erde ein und drückt nun in den gefüllten 
Cylinder den Stöpsel hinein, so, dass erst 1 bis 2 ccm und nach deren 
Entfernug mit sterilem Messer genau 1 ccm Erde hervorstehen. Letz¬ 
tere Erdpartie wird in einen oben geöffneten Cylinder fallen gelassen, 
in dem sich 50 ccm sterilisirtes Wasser befinden. Durch Watteverschluss 
gegen Verunreinigung geschützt, wird der Cylinderinhalt möglichst bald 
der Verarbeitung pro 0,1 ccm zu Plattenculturen — statt der Glasplatten 
nimmt Verf., nach Esbach, flache dünne Flaschen 609 — unterworfen. 
Zum Zählen der Colonien benutzte er eine Zählplatte nach Ranviek, bei 
welcher die Zählung mit Vortheil im durchfallen den Lichte vor¬ 
genommen wird. 
Auch Klementieff constatirte bei seinen nach obigem Verfahren 
angestellten Untersuchungen die Thatsache der successiven Abnahme 
der Keimmenge in den tieferen Bodenschichten und glaubt zugleich einen 
gewissen Parallelismus zwischen Ammoniakschwankungen und Mikro¬ 
organismenmenge, wenn auch nicht als Regel, gefunden zu haben. 
Hueppe (781) bedient sich, um das Blutserum in geeigneter Weise 
als Matrix für P la 11 e u - Culturen anzuwenden 67 °, jetzt, nachdem ihn 
frühere Versuche, eine direct gussfähige Blutserumgallerte herzustellen, 
nicht völlig befriedigt hatten, folgenden combinirten Verfahrens: 
Das flüssige, sterilisirte oder steril aufgefangene Blutserum wird aut 
37° C. erwärmt und in der bei dem Plattenverfahren üblichen Weise 
mit der zu untersuchenden bacterienhaltigen Substanz beschickt; 
werden Verdünnungen der ersten Aussaat gemacht, so muss die ge¬ 
nannte Temperatur des Serums auch hierbei innegehalten werden. 
Inzwischen ist die vorbereitete Agar - Gallerte (2procentige Agar- 
Bouillon mit Zusatz von 0,5 bis 1 Procent Traubenzucker) durch 
höhere Temperatur verflüssigt und wieder auf 42 bis 45 0 C. abgekühlt 
worden. Nun wird einfach unter den gewöhnlichen Vorsichtsmaassregeln 
das warme, inficirte Blutserum zu etwa der gleichen Menge warmer 
Agarlösung zugefügt, gut umgeschüttelt und dann erfolgt das Erstarren 
der gleichmässigen Mischung auf Platten, in Kolben oder Rollschichten 
bei Zimmertemperatur. Nach dem Erstarren kommen die Culturen in 
den Thermostaten. In dieser Weise gelang Hueppe die Isolation der 
Tuberkelbacillen aus Sputum ziemlich gut. PIueppe giebt dann noch 
einige Rathschläge hinsichtlich der Darstellung des coagulirten Blut¬ 
serums zu dem gewöhnlichen Zwecke von Reagensculturen. Die dis- 
continuirliche Sterilisation und nachherige Coagulation nimmt Hueppe 
669 ) Vergl. oben (p. 468) Wilfartii’s Methode. Ref. 
67 °) Vergl. Unna, d. vorjähr. Ber. p. 429. Ref. 
