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Ruhrbacillen. Toxin. 
Auch keimfreie Bouillonkulturfiltrate verschiedenen Alters zeigten Gift¬ 
einwirkung, die Filtrate von 4-5tägigen Kulturen schwache, die von 2 bis 
4 Wochen alten recht kräftige. L. glaubt aber, dafs es sich bei der Wir¬ 
kung solcher Filtrate, wie auch in den ersten Versuchen mit Autolysaten 
um Endotoxinwirkung handelt, da er in alten Kulturen viele zerfallene 
Bac. und Involutionsformen gesehen hat. Befunde, durch die er sich zu der 
Annahme berechtigt glaubte, dafs in solchen alten Kulturen Bestandteile 
der Zellkörper in Lösung gehen. 
Kulturen auf ei weifsfreien Nährböden produzierten geringe Giftmengen. 
Auch Bereitung des Nährbodens aus Gehirnsubstanz hatte keinen fördern¬ 
den Einflufs auf die Giftproduktion. Die günstigsten Resultate hatte die 
Züchtung der Ruhrbac. in gut alkalischer Bouillon, die in flache Schalen 
gefüllt war, so dafs sie dem Luftzutritt eine möglichst grofse Oberfläche 
bot. Von dem Filtrat derartiger 10 Tage alter Kulturen eines Kruse- 
Stammes genügten 0,1-0,05 ccm, um in 1-2 Tagen den Tod eines grofsen 
Kaninchens herbeizuführen. In gleicher Weise gewonnene Kulturfiltrate 
eines Flexner- Stammes liefs keine Gift Wirkung erkennen. 
Es gelang L. mit kleinen Toxindosen des KnusE-Stammes, eine Ziege zu 
immunisieren, der antitoxische Wert des Serums dieses Tieres war jedoch 
nicht hoch, es wirkte etwa 4mal so stark wie normales Ziegenserum. L. 
beobachtete als Folge der Toxininjektion eine sehr starke Verminderung 
der Leukocyten, die bei letalen Dosen sich bis zum Leukocytenscliwund 
steigerte; erholten sich die Tiere,-so trat eine starke Hyperleukocytose ein. 
Lentz. 
Zur Gewinnung gelöster Endotoxine von Typhus-, Pest- und Dysenteriebac. 
schlägt Besredka (853) folgendes Verfahren ein: 
16- 18sttindige Agarkultur von Typhus- oder Dysenterie- bezw. 48stün- 
dige Agarkulturen von Pestbac. werden in physiologischer Kochsalzlösung 
aufgenommen, 1 Stunde auf 60° C. erhitzt und im Vakuum getrocknet. 1 g 
der trockenen Bakterien werden mit 0,3-0,45 g trockenen Natriumchlorids 
im Achatmörser zu einem feinen Pulver (1 Stunde lang) verrieben. Zu 
dem Pulver werden unter fortwährendem Reiben tropfenweise 1-2 ccm. 
Aq. dest. zugefügt. In der entstehenden konzentrierten Salzlösung werden 
die Bac. agglutiniert. Die Emulsion bringt man in ein Reagensglas und 
fügt soviel Aq. dest. hinzu, dafs die Konzentration physiologischer Koch¬ 
salzlösung erreicht wird. Man schüttelt die Mischung mehrmals und läfst 
die Bac. bis zum nächsten Tage absitzen. 
Enthält die Aufschwemmung Typhusbac., so wird sie jetzt 2 Stunden 
lang auf 60-02° C. erhitzt. In 10-12 Stunden sitzen alsdann die Bakterien¬ 
leiber am Boden des Glases ab und die darüber befindliche durchsichtige 
und stark opalisierende Flüssigkeit enthält die Endotoxine frei von den 
Bakterienleibern. 
Da die Endotoxine von Dysenterie- und Pestbac. eine längere Erhitzung 
nicht vertragen, mufs man die Aufschwemmungen dieser Bakterien so lange 
zentrifugieren, bis die Flüssigkeit keine Bac. mehr enthält; in ihr sind 
dann die Endotoxine gelöst. 
