158 Milzbrandbacillus. 
Methode zur Gewinnung asporogenen Milzbrandmaterials. 
Aufbewahrungsstellen dauernd controllirt. In vierzehntägigen Intervallen 
wurden die Culturgläschen gegen neue ausgetauscht. 
Es stellte sich heraus, dass die Milzbrandbac. nur in 2 m Tiefe 
überhaupt noch spärlich wuchsen, und zwar hier nur im Monat Juli. 
Sporenbildung fand in 1 ’/ 2 m Tiefe nur im Juli, in */ 2 -l m Tiefe in den 
Monaten Juni, Juli, August statt. Von bestimmendem Einfluss 
war die Temperatur im Boden. Das Wachstlium der Bacillen 
war nur bei Temperaturen über 14° C., Sporenbildung erst bei 
solchen über 15° C. möglich. Die unter der Erde ausgewachsenen 
Milzbrandbac. waren vielfach in ihrem Aussehen und ihrer Färbbarkeit 
beeinträchtigt, also wohl zum Theil degenerirt. In 2-3 Wochen star¬ 
ben die Culturen im Erdboden ab, wenn sie keine Sporen gebildet hatten. 
Milzbrandblut-Culturen, welche absichtlich mit Fäulnissbacterien ge¬ 
mischt wurden, gingen selbst in den günstigen Monaten Juni bis August 
schon in einer Woche zu Grunde und vermochten nie Sporen zu 
bilden. Petruschky. 
Roux (286) erinnert an die von ihm gemeinsam mit Chamberland 
i. J. 1883 gemachte Veröffentlichung über Gewinnung asporogenen 
Milzbrandes durch Züchtung in Bouillon mit Zusatz von 1:2000 Kalium 
bichromat. Diese Arbeit sei in den späteren Veröffentlichungen über 
asporogenen Milzbrand von Lehmann 1 und Behring 2 nicht erwähnt. 
Lehmann macht er zum Vorwurf, dass derselbe keine bestimmte Me¬ 
thode angiebt, durch welche man mit Sicherheit den Verlust der Sporen¬ 
bildung beim Milzbrandbac. erzielen könne, sondern mehr durch einen 
glücklichen Zufall („liasard“) zu einem sporenlosen Milzbrandbacillus 
gekommen sei, während Behring zwar anführt, dass er durch Rosol- 
säurezusatz zur Bouillon sein Resultat erzielt habe, aber die Quantität 
des Zusatzes nicht angiebt. 
Als sicheres Verfahren zur Erzielung asporogenen aber viru¬ 
lenten Milzbrandmaterials giebt R. nun neuerdings folgendes an: Ver¬ 
schiedene Bouillon-Röhrchen werden mit Phenollösung im Verhältniss 
von 2 : 10000 bis 20 : 10000 versetzt und mit Milzbrandblut geimpft, 
wobei darauf zu achten ist, dass alles Impfmaterial in der Flüssigkeit 
untersinkt. In den Röhrchen mit Phenol 2 : 10 000 bis 6 : 10 000 be¬ 
halten die Bacillen die Fähigkeit der Sporenbildung noch in der Regel 
bei; das Röhrchen mit 20: 10 000 bleibt steril; in den dazwischen 
liegenden Verdünnungsstufen wächst Milzbrand, welcher nach etwa 8- 
bis lOtäg. Aufenthalt in der Nährflüssigkeit die Fähigkeit verloren hat, 
bei weiterer Fortpflanzung in gewöhnlicher Bouillon, Gelatine, Agar, 
erstarrtem oder flüssigem Serum Sporen zu bilden. Bei der Passage 
*) Cf. Jahresber. III (1887) p. 101. Ref. 
2 ) Cf. Jahresber. V (1889) p. 150. Ref. 
