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ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR 
ce qu'une émulsion de leurs microbes comme antigène provo¬ 
quait la fixation de l'alexine dans un système hémolytique avec 
un sérum du sang de malades et de convalescents de la coque¬ 
luche. Ceci, qui était important tant pour l’étiologiste que pour 
le diagnostic, fut contesté plus tard par certains investigateurs, 
entre autres par des savants de l’Institut sérothérapique de 
Vienne, et de l'Institut Rockefeller, de New-York. C’était, 
entre autres choses, pour examiner ce qui en était que nous 
avons autrefois entrepris notre travail. 
Dans notre premier mémoire, nous avons dit que, par 
une émulsion d’une densité assez grande, correspondant à 
2.000 millions de microbes environ par cent, cube, nous avons 
obtenu un résultat positif chez 22 malades sur 23, examinés 
de la fin du premier mois de la maladie jusqu’à 3 mois, à peu 
près, après le commencement de la maladie. De 102 essais 
témoins tous étaient négatifs, à part 1 qui provenait d'une 
femme âgée de vingt-neuf ans, qui avait eu la coqueluche dans 
son enfance. 
L’antigène a été fraichement préparé pour chaque jour d’essai d’une cul¬ 
ture de gélose-sang vieille de quarante-huit heures. Cette émulsion, dont la 
densité, nous venons de le dire, correspondait à 2.000 millions, à peu près, 
de microbes par cent, cube, était employée dans des mélanges différents : 
8 volumes d’émulsion -f- 2 volumes de solution physiologique stérile de 
NaCl, 4 volumes d’émulsion -f- 6 volumes de solution salée, 2 volumes 
d'émulsion 4- 8 volumes de solution salée, 1 volume d’émulsion + 9 volumes 
de solution salée, 1 part d’émulsion -f- 19 parts de solution salée. De ces 
solutions étendues on a toujours employé 1 cent, cube dans l’essai. La 
technique des tentatives de fixation de l’alexine a, du reste, été celle dont on 
se sert généralement à l’Institut sérothérapique. 
Le système hémolytique consiste en globules de sang de mouton, en 
substances sensibilisatrices de sang de mouton préparées sur lapin et, 
comme alexine, en sérum frais de cobaye, toujours dans un mélange de 
1 partie d'alexine -f- 9 parties d’eau. Les doses employées sont, pour le sang 
de mouton, 0,5 cent, cube d’une solution à 5 p. 100 de globules dans une solu¬ 
tion physiologique stérile de NaCl, à laquelle on ajoute 0, 5 cent, cube d’une 
solution de substance sensibilisatrice, contenant 2 à 3 unités. Comme la force 
de l’alexine varie dans les sérums des différents cobayes il faut déterminer 
par des essais préliminaires le minimum d’alexine nécessaire pour obtenir 
l’hémolyse totale. L’addition d’antigène au système hémolytique affaiblit 
l’hémolyse, de sorte qu’une quantité plus grande d’alexine est nécessaire 
pour obtenir l’hémolyse totale. Cette quantité d’alexine se détermine aussi 
par un essai préliminaire avec le système hémolytique antigène. En général, 
avec notre antigène la différence entre les deux valeurs de la quantité 
d’alexine est petite. Ainsi, si dans le système hémolytique seul on emploie 
0,2 cent, cube de solution d’alexine, il faut en employer 0,25 cent, cube en 
