SUR LA CULTURE DES MICRORES ANAÉROBIES-. 57 
l’avoir chauffée, on la casse en a avec une pince flambée ; le gaz 
s’échappe, empêchant l’introduction de l’air: par l’orifice on fait 
pénétrer le fil de platine ou une tige de verre avec laquelle on 
fait la piqûre. 11 est facile de conserver le tube plein de gaz, ou de 
le vider si l'on veut ensuite étudier le gaz que dégagera la 
culture de l’organisme anaérobie. L’appareil est détaché par un 
trait de chalumeau sur la partie étranglée b. 
On peut enfin mettre à profit la propriété d’absorber l'oxy¬ 
gène de l'air, que certains microbes,tels quelebacillussubtilis,ont 
à un haut degré. Semons du bacillus subtilis dans un tube conte¬ 
nant du bouillon de veau neutre, teinté par une goutte de solution 
d’indigo bleu, et fermons le tube à la lampe. Le bacillus subtilis 
vaformerun voile à la surface, et bientôt il aura absorbé l’oxygène 
libre contenu dans le liquide et l’espace clos du tube. Il réduira 
ensuite l’indigo, le transformera en indigo blanc; la décoloration 
duliquide indiquera qu’il n’y a plus du tout d’oxygène libre dans le 
tube. Même si on laisse le tube ouvert, le bacillus subtilis oppose 
un passage à l’air, et le liquide reste décoloré dans le fond. 
Pour utiliser cette propriété du bacillus subtilis, on peut 
opérer comme il suit. On liquéfie par la chaleur la gélatine ou la 
gélose contenue dans un tube à essai ordinaire, on la porte à 
l’ébullition pour chassertout l’air, puis on la solidifie rapidement 
en plongeant le tube dans de l’eau froide. Au moyen d’un fil depla- 
tine, on pratique la piqûre comme à l’ordinaire, et on fait tomber 
au-dessus de la surface de la gélatine un peu de gélose liquéfiée. 
Quand le bouchon de gélose est solide, on introduit dans le tube 
une culture pure de bacillus subtilis dans du bouillon, et on 
ferme l’extrémité h la lampe. Le bacillus subtilis forme promp¬ 
tement un voile à la surface, prend tout l’oxygène contenu dans 
le tube, et au-dessous l’organisme anaérobie pousse parfaitement 
à l’abri, séparé de la culture liquide par le bouchon de gélose 
qui ne se liquéfie pas. Il dégage des gaz qui se diffusent dans la 
gélatine et y creusent des vacuoles. Ce tour de main très 
simple donne de bons résultats. Pour faire ensuite une prise de 
semence sans prendre en même temps du bacillus subtilis, on 
lave extérieurement le tube; vers le milieu de la culture on fait 
sur le verre un trait à la lime, avec le charbon Berzélius on 
détache la partie inférieure du tube, et on peut puiser facilement 
et avec pureté le microbe anaérobie. 
