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ANNALES DE L’INSTITUT PASTEUR. 
III 
Le graüd intérêt de l’emploi des milieux solides est la sépa¬ 
ration des organismes microscopiques. On conçoit aisément les 
difficultés qui se rencontrent dans l’application aux anaérobies 
de la méthode de culture sur plaque. On a essayé de les tourner 
en appliquant sur la surface de la plaque de gélatine une lame 
de mica stérilisée (M. Koch), ou encore en remplissant de 
gélatine fondue un tube à essai sur les parois duquel on a étalé, 
en couche mince, la gélatine ensemencée avec l’organisme 
anaérobie,pourisoler les colonies selon le procédé de M.Esmarch. 
On a aussi essayé les cultures sur plaques sous des cloches rem¬ 
plies d’un gaz inerte. Par ces artifices, on pourra examiner la 
forme de la colonie d’un microbe anaérobie, surtout s’il n’est 
pas très sensible à l’action de l’oxygène, car pendant le refroi¬ 
dissement, la gélatine dissout toujours un peu d’air. 
Le dispositif suivant, que nous employons depuis long¬ 
temps 1 , permet la séparation des colonies et la récolte de la 
semence dans les colonies isolées. 11 se compose d’un tube 
de verre fermé, large de 3 centimètres environ, long de 25 à 
30 centimètres, et terminé par un tube plus étroit, obturé par 
un tampon de coton. Ce tube (fig. 5.i) contient un peu de géla¬ 
tine stérilisée; on fond la gélatine et on introduit, avec les pré¬ 
cautions ordinaires, une quantité de semence convenable pour 
avoir des colonies séparées. En ensemençant plusieurs tubes 
avec des quantités de semence de plus en plus petites, on arrive 
toujours à une séparation parfaite des colonies. On étrangle le 
tube à la lampe (fig. 5, 2 ), un peu au-dessus de la partie renflée, 
en c. On pousse le coton obturateur jusqu’à cet étranglement, 
et on étire le tube en A. L’appareil ainsi disposé est mis en 
communication avec la machine à vide, et il est purgé d’air 
comme nous l’avons déjà expliqué. On le sépare en fondant au 
chalumeau en A, et on le couche sur un plan horizontal. La 
gélatine s’étale sur la paroi inférieure. Elle fait prise, et comme 
la couche est très mince, on pourra examiner à travers la paroi du 
i. Tous les appareils dont il est question ici ont figuré à l’exposition d’hygiène 
de Londres, en 1884, et à celle de Paris, en 1886. De plus, ils ont été montrés dans 
les conférences faites en 188S et 1886 par M. Perdrix aux médecins qui ont visité 
le laboratoire de la rue d'Ulm. 
