n’avail pu obtenir le développement de son microbe dans ce 
milieu. 
A 22°, température que nous avons choisie à l’exemple de 
nos prédécesseurs anglais, la culture se fait lentement. Au troi¬ 
sième jour, on ne note encore aucune multiplication des para¬ 
sites. C’est seulement vers le septième jour que celle-ci se pro¬ 
duit. Au douzième jour, la culture est déjà très abondante. La vita¬ 
lité du microbe paraît très longue: nous possédons des cultures 
âgées de 3 mois dans lesquelles les parasites sont encore vivants 
et mobiles. 
Le repiquage des cultures est aisé, nous avons déjà obtenu six 
passages successifs; au 6 e passage, la culture est aussi abondante 
qu’au premier; elle est même plus rapide; il n’y a pas de raison 
pour que les repiquages ne puissent être continués indéfiniment. 
M. Mesnil, auquel nous avons adressé une culture, a obtenu, 
avec le concours de M. le D r Brimont, les mêmes résultats que 
nous. 
Notre milieu est ainsi préparé: 
A des tubes d’agar ordinaire (bouillon de viande 1 litre, peptone 10 gr., 
sel marin 5 gr.) à réaction très faiblement alcaline (7 cent, cubes de la 
solution normale de soude sont ajoutés après neutralisation parfaite au 
tournesol), liquéfiés vers 50-55°, nous mélangeons un tiers de leur volume 
de sang de lapin prélevé par ponction aseptique du cœur (1) ; les tubes 
sont inclinés et abandonnés ainsi une demi-journée à la température ordi¬ 
naire ; on les cachète ensuite à la cire et on les porte d’abord 5 jours dans 
l’étuve à 37 0 , puis un temps égal dans celle à 22 °. Ces dernières mani¬ 
pulations n’ont pas seulement pour but de vérifier la stérilité de nos mi¬ 
lieux, mais de permettre la diffusion des substances nutritives de la partie 
solide dans l’eau de condensation. 
Nous avons pu nous convaincre que les tubes qui venaient d’être préparés 
convenaient médiocrement au développement des parasites. Nous essayons 
actuellement des milieux moins complexes et nous espérons pouvoir donner 
bientôt une technique simplifiée de la culture de ces microbes. L’ensemen¬ 
cement doit être fait aussitôt après le prélèvement du sang splénique (2) et 
les tubes ensemencés doivent être cachetés avec le plus grand soin afin 
d’éviter la dessication. 
(1) Pour la technique de la ponction du cœur, consulter notre note de la 
Société de Biologie, 4 juillet 1903. 
(2) Pour pratiquer la ponction splénique, se servir d’une aiguille fine et 
neuve en acier, montée sur une seringue; bien vérifier le fonctionnement 
de la seringue; stériliser à l’autoclave; mettre à sécher à l’étuve. Cette der¬ 
nière précaution est indispensable, car une trace d’eau restée dans la serin¬ 
gue nuit considérablement aux préparations microscopiques. Appliquer sur 
la peau une couche de teinture d’iode, piquer au milieu. Faire d’abord les 
ensemencements, ensuite les frottis sur lames. 
