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pre, contenant de l’eau distillée, 14 g. de gélose. Après 5 à 6 h., 
renouveler l’eau distillée et après 24 h. de macération, vider l’eau. 
On ajoute alors à la gélose gonflée, la quantité d’eau distillée 
nécessaire pour arriver au poids de 914 g., puis 6 g. de sel. Faire 
fondre, filtrer, répartir en tubes à essais de 15 cm. de long sur 
16 mm. de diamètre et à raison de 4 à 5 cm 3 par tube. Stériliser. 
La macération préliminaire de la gélose dans l’eau distillée, que 
nous avons introduite dans la technique, paraît avoir une certaine 
importance en débarrassant l’agar-agar des substances étrangè¬ 
res solubles. Quelques difficultés de culture que nous éprouvions 
autrefois dépendaient de la présence de ces impuretés et ont dis¬ 
paru depuis que nous nous servons de gélose lavée. 
Pour compléter le milieu, nous y ajoutons du sang de lapin 
prélevé par ponction aseptique du cœur et à raison, d’une partie 
de sang pour trois de gélose. Pour incorporer ce sang, il faut 
d’abord faire fondre au bain-marie la gélose en tube, ce qu’on 
obtient en amenant l’eau à l’ébullition pendant une ou deux mi¬ 
nutes ; pour plus de commodité nous plaçons les tubes dans un 
panier en fil métallique contenant une vingtaine de divisions pour 
autant de tubes. 
Il est nécessaire, la fusion de la gélose obtenue, de refroidir 
l’eau du bain-marie, de façon qu’au moment de l’addition du 
sang au milieu, elle soit à une température comprise entre 53 
et 55 °- 
On incline les tubes gélose-sang et le lendemain on les place à 
l’étuve (37 0 ) pour éprouver leur stérilité. Il est bon de les retirer 
de l’étuve au bout de 24 h., pour éviter en même temps qu’une 
dessiccation trop intense, une trop grande concentration de l’eau 
de condensation, ce qui constitue une cause d’insuccès. Pour la 
même raison, en été, il convient de conserver le milieu dans un 
endroit frais. 
Au surplus, pour éviter la dessiccation du milieu et aussi pour 
le mettre à l’abri des poussières qui finiraient par cultiver dans le 
bouchon et contaminer la gélose, nous plaçons chaque tube pré¬ 
paré dans un autre tube d’un diamètre immédiatement supérieur 
et par le fait un peu plus long, placé l’ouverture en bas. Le tube 
contenant le rrylieu est maintenu l’ouverture bien appliquée sur 
le fond de celui qui l’emboîte à l’aide d’un tampon de coton 
introduit au-dessous du fond du tube le plus petit (voir la fig.). Il 
est utile de flamber l’extrémité ouverte du plus étroit et l’extré- 
