Séance iju io Mars 1915 
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culture servira, après i 5 à 18 heures d’étuve, à l’épreuve de 
l'agglutination. 
d) Celte épreuve se fait soit à titre préliminaire pour avoir 
une première indication sur les colonies obtenues au cours de 
l’isolement des vibrions, soit à titre définitif pour évaluer le 
taux exact d’agglutinabilité de l’espèce à essayer. 
Epreuve préliminaire . — Pour avoir un résultat net en peu de 
temps, il convient d’employer d’assez fortes doses de choléra- 
sérum. Avec le sérum agglutinant de l'Institut Pasteur, par exem¬ 
ple, on opérera sur des dilutions à r/ 5 oo. On peut procéder 
simplement en délayant dans une goutte de la dilution sérique, 
une petite quantité de culture prélevée sur la colonie suspecte 
développée sur milieu Dieudonné. En quelques minutes, trente 
au plus, à 1-a température ordinaire, on voit la goutte apparaître 
comme constituée par un liquide clair, dans lequel les vibrions 
agglutinés forment un réseau assez semblable aux mailles d’un 
filet. Une goutte témoin d’eau salée physiologique ayant reçu 
une quantité à peu près équivalente de culture, doit avoir con¬ 
servé son aspect uniformément trouble (Ce contrôle est absolu¬ 
ment indispensable, car nombre d’espèces microbiennes, surtout 
en cultures très jeunes, se laissent mal délayer et peuvent pro¬ 
duire des apparences faisant croire à une agglutination). 
Le phénomène s’observe sans difficulté à l’œil nu, mais on 
peut aussi le suivre au microscope entre lame et lamelle, sous un 
faible grossissement. 
Si l’agglutination se manifeste nettement dans les conditions 
indiquées, la colonie examinée est vraisemblablement choléri¬ 
que; dans le cas contraire, l’épreuve reste sans conclusion. 
Détermination du titre agglutinatif. — On prépare une série de 
dilutions de choléra-sérum dans l’eau salée physiologique, aux 
taux de 1/200, i/ 5 oo, 1/1.000, etc. On met dans de petits tubes à 
essai 1 cm 3 de dilution sérique, puis dans chacun d’eux on ajoute 
1 cm 3 d’une émulsion obtenue en délayant dans 2 «5 cm 3 d’eau 
salée physiologique stérilisée une culture sur gélose, âgée de 
18 h., du vibrion à examiner. On met les mélanges à l’étuve à 
37° et on observe les résultats au bout de 2 h. On considère comme 
ayant donné un résultat positif, toute dilution dans laquelle les 
vibrions sont réunis en grumeaux déposés au fond du tube, et 
laissant au-dessus d’eux un liquide clair. 
Il est indiqué de faire en même temps, dans les mêmes condi- 
