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fein. Es wurde nun in einem Satz „Nobbes Samensiebe für Klee¬ 
proben“ — eDgstc Siebweite 0.5 mm — ausgeschüttelt und dabei 
Sorge getragen, daß die Rückstände bei grünen und gelben Blät¬ 
tern derselben Pflanze quantitativ gleich waren. Das auf einmal 
in größerer Menge hergestellte Mehl, in fest verschließbaren 
Flaschen im Dunkeln aufbewahrt, behielt monatelang seine Farbe 
unverändert bei. Die Extraktion des Carotins, dessen quantita¬ 
tives Verhalten während der nekrobiotischen Phase der Verfärbung 
im I. Teil dieser Arbeit zu bestimmen versucht wurde, erfolgte 
mit Hille des Petrolätherverfahrens. Petroläther entzieht den 
Blättern nur das Carotin, daneben geringe Mengen von Chloro¬ 
phyll, oder, im Falle daß gelbe Blätter vorliegen, geringe Mengen 
beim Verseifen sich braun färbender Pigmente. Ob es sich um 
einen Teil der von Ts wett gefundenen, im lebenden Blatt farb¬ 
losen, bei Einwirkung von Alkali schön gelben Substanzen handelt, 
habe ich bisher nicht näher untersucht. 
Eine absolute Erschöpfung der Blattmehle an Carotin ließ 
sich in weitgehender Annäherung durch 15—16 ständige Extraktion 
von je 3 gr Blattpulver mit 40 ccm Petroläther erreichen. Die 
Extrakte standen im Dunkeln in luftdicht schließenden Glasge¬ 
fäßen, die mehrmaliges Aufschütteln des Blattmehls ermöglichten. 
Das extrahierte Blattmehl wurde durch Filtration vom carotin¬ 
haltigen Petroläther getrennt und einige Male mit frischem Ex¬ 
traktionsmittel nachgewaschen, natürlich stets mit gleichen Mengen 
— etwa 5—10 ccm bei grünen und gelben Blättern. Im Scheide¬ 
trichter fand die Verseifung der kleinen Mengen mitgeführten 
Chlorophylls statt. Da ein Schüttelapparat zunächst nicht zur 
Verfügung stand, wurden die Extrakte aus gelben und grünen 
Blättern nach Zugabe von zuerst 10 ccm und dann noch zweimal 
je 5 ccm konzentrierter, methylalkoholischer Kalilauge eine halbe 
Stunde mit der Hand gleichzeitig kräftig geschüttelt. Vor Zugabe 
frischer Kalilauge floß das grünbraun gefärbte Verseifungsprodukt 
ab. Der Rest der Kalilauge wurde mit destilliertem Wasser sorg¬ 
fältig ausgewaschen, indem einmal 50 und zweimal 25 ccm Wasser 
langsam zugegeben wurden unter leichtem Umschwenken des 
Scheidetrichterinhalts. Die restlose Durchführung des Verseifungs¬ 
prozesses zeigte sich durch den auftretenden reingelben Farbton 
des Petroläthers und das Fehlen jeglicher Fluoreszenz an. Um 
beim Auswaschen das lästige Auftreten von Emulsionen zu ver¬ 
meiden, läßt man Wasser immer allmählich an der Wand des 
Scheidetrichters entlang fließen und schwenkt langsam um, ohne 
zu schütteln. 
Das dritte Waschwasser blieb meist farblos, im andern Falle 
wurde das Auswaschen fortgesetzt. Alle Spuren der Tswettschen 
durch Kalilauge gelb gefärbten Substanzen waren somit sicher 
entfernt. Um ihnen die letzten Wasserreste zu entziehen, flössen 
die Extrakte durch einen mit einem trockenen Filter belegten und 
einigen Gramm Natriumsulfat beschickten Trichter hindurch lang¬ 
sam in die Meßkölbchen. Das Natriumsulfat wurde von anheften- 
