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Per fare dei preparati dalle membrane degli embrioni si raccoglieva l’aja vasco- 
losa e l'embrione dalle prime 24 alle 36 ore dell’incubazione e da quest'epoca in 
su la sola aja vascolosa a scopo di trovare i microbii nei vasi sanguigni; i preparati si 
facevano nel seguente modo: si toglieva la membrana vitellina rasentando i vasi peri- 
ferici della aja vascolosa, sotto acqua la membrana vitellina si distaccava meglio con 
pinzette e si distendeva allora l'aja vascolosa privata della membrana vitellina su lastre 
porta oggetti, dove era indurita e fissata dall'alcool, e poi veniva colorata per le ricerche 
dei microbil. 
Riusciva più facile distendere la membrana della vescica allantoide e di que- 
st ultima per alcuni embrioni si facevano varî preparati. 
Verso il diciottesimo e ventesimo giorno d'incubazione si potevano fare ancora 
preparati e colture dalla milza. i 
La colorazione dei preparati fatti per strisciamento su lastrine, veniva eseguita 
dopo che gli stessi erano essiccati alla lampada e fissati nell’alcool, ed il metodo di 
colorazione variava a secondo la qualità del parassita innestato. 
Dal sedicesimo al ventesimo giorno d' incubazione, furono fatti tagli microscopici 
del fegato dell'embrione e colorati per la indagine dei microbii. 
Agli animali di controllo non solamente fu innestata l’albumina delle uova in- 
fettate, ma ancora il fegato e lo stomaco dell’ embrione. 
Dal sesto al decimo giorno d'incubazione fu innestato l'embrione intero all’ani- 
male di controllo, dal dodicesimo al ventunesimo giorno in poi fu innestato isolatamente 
per ciascun animale il fegato, lo stomaco e qualche rarissima volta ancora il cervello. 
Tutte queste numerose prove di controllo ebbero il duplice scopo di costatare la 
presenza dei microbii negli organi, il grado loro di virulenza e la quantità degli stessi 
raccolta in ciascun organo di embrione, la cui dose era capace di uccidere un animale 
di controllo, mentre l’ embrione sopravviveva. 
Si fecero numerosi esperimenti di controllo, non per un lusso sperimentale, ma 
perchè era necessario di sapere se esisteva il microbio nei tessuti dell'embrione, e se 
conservava il suo potere patogeno; poichè sì trattava di misurare non solo l’azione del- 
l'embrione sui microbii contenuti nei suoi tessuti, ma ancora quella sul sostrato nutritivo 
comune all’embrione ed ai microbii (albumina), dove i bacterii per qualche tempo 
restavano, (se innestati a principio di incubazione), prima di penetrare nei tessuti del- 
l'embrione, perchè come appresso si vedrà prima del nono giorno non penetravano 
nei tessuti embrionali i microbii. 
Dalle leggi dell’ incubazione delle uova sì sa, che l'’albumina cambia di composizione 
chimica durante lo sviluppo dell'embrione, da insolubile diviene solubile, ed acquista 
sotto l'influsso della vita dell’ embrione le qualità di una sostanza albuminoide pepto- 
nizzata, ed aumentano i peptoni in ragione diretta, che progredisce lo sviluppo del- 
l'embrione. 
I microbii che si ponevano nell’albumina, erano eminentemente aerobii; ora attra- 
verso il guscio dell'uovo penetra dell'ossigeno, ma questo è fissato ‘dall’ embrione in 
sviluppo, quindi la relativa mancanza dell'ossigeno poteva essere di danno alla vita 
dei microbii innestati nell’albumina, e non si poteva venire alla conclusione, se la di- 
struzione dei microbii era dovuta al mezzo nutritivo divenuto inadatto (albumina) ov- 
