Natur 
406 Gohlke: Die Serumdiagnostik im Dienste der Pflanzensystematik. eee ee 
tion und die Konglutination haben sich als beson- 
ders geeignet fiir botanische Untersuchungen ge- 
zeigt. Die Präzipitation, die älteste und bekann- 
teste Methode, ist besonders einfach und erfordert 
nur.ein Antigen und ein Immunserum. In sich ab- 
stufenden Verdünnungen des Antigens wird eine 
gleiche Menge des Immunserums hinzugegeben, 
wobei dann nach geringer Zeit ein Niederschlag 
den Nachweis zeigt, daß das Antigen zugehörig 
ist zu dem verwendeten Immunserum. Mit Hilfe 
dieser Methode sind auch die ersten Versuche 
einer Verwandtschaftsreaktion angestellt worden. 
Für die Botanik hat die Präzipitation insofern 
einen großen Vorzug, neben ihrer einfachen Hand- 
habung, vor anderen Methoden, daß sie verwandt- 
schaftliche Beziehungen weit über die Ausgangs- 
familie hinaus zu anderen Familien derselben 
Reihe nicht nur, sondern, was noch wichtiger. ist, 
zu anderen Reihen hinüber, zur Anschauung 
bringt. 
Die Konglutination ist insofern komplizierter 
als die Präzipitation, als zu ihrer Anwendung noch 
das Serum eines Wiederkäuers (z. B. Rinder- 
serum) gebraucht wird. Das Immunserum und der 
Eiweißextrakt werden bei 37° ©. auf 2 Stunden 
in Kontakt. gebracht, d. h. der Extrakt wird sensi- 
bilisiert, darauf wird frisches, aktives Rinder- 
serum hinzugefügt. Dort, wo größere Mengen von 
Immunserum vorhanden sind, entsteht dann eine 
deutliche Konglutination, d. h. eine Ausflockung, 
die jedoch von einer solehen der Präzipitation oder 
Agglutination streng verschieden sich erweist. 
Dasselbe gelingt, wenn anstatt des aktiven Rinder- 
serums inaktiviertes, d. h. auf 56° C. erhitztes 
Rinderserum und als Komplement die Sera eines 
Pferdes, Schafes oder Meerschweinchens verwen- 
det werden. 
Diese charakteristische Zusammenballung ent- 
steht wohlgemerkt im Rinderserum bei Gegenwart 
von Antigen, Ambozeptor und Komplement und 
beruht darauf, daß das Rinderserum einige Stoffe 
enthält, die als Konglutinine bezeichnet werden 
und die Konglutinationen hervorrufen. Gerade 
diese Methode hat sich nach meinen Unter- 
suchungen als die beste für den Nachweis zweifel- 
hafter Verwandtschaftsverhältnisse erwiesen !). 
Die Vorteile derselben bestehen in der idealen 
Empfindlichkeit, welche die der Präzipitation 
wesentlich überragt und besonders in dem dabei 
auftretenden geringen Immunserumverbrauch, der 
es gestattet, von einem Ausgangsambozeptor Hun- 
derte von Versuchen zu machen nach allen Rich- 
tungen hin innerhalb des Pflanzenreiches. 
War eine Brauchbarkeit dieser Methoden wohl 
für medizinisch-hygienische Anwendung erwiesen, 
so zeigten die bisher erschienenen Resultate auf 
botanischem Gebiete Lücken und Fehler, daß sie 
nicht ohne weiteres für die Verwendung der 
1) Gohlke, K., Die Brauchbarkeit der Serum- 
Diagnostik für den Nachweis zweifelhafter Verwandt- 
schaftsverhältnisse im Pflanzenreiche. Fr. Grub, Ber- 
lin und Stuttgart, 1913. 
Serumdiagnostik sprachen. 
gestellt, daß eine Ausnutzung der Methoden zum 
Nachweise von Verwandtschaft möglich sei. Die- 
ses ist jedoch keineswegs so leicht für die Botanik 
zu erweisen, da das in Frage kommende Injek- 

Ähnliche Versuche — 
in der Zoologie hatten mehrfach die Tatsache fest- 
tionsmaterial nicht so gute und gleichartige Be- 
schaffenheit und Eiweißgehalt zeigt, wie dies bei 
dem tierischen Blut der Fall ist. Überdies kann 
ich die Erfahrung meiner Vorgänger bestätigen, 
daß sich das pflanzliche Eiweiß serobiologisch 
schwerer differenzieren läßt als das tierische, aber 
gerade diese Beobachtung und Feststellung läßt die 
Erwartung aufkommen, die Methoden auch zur 
Markierung ziemlich entfernter Verwandtschaf- 
ten zu verwenden. Es heißt nämlich „schwer dif- 
ferenzierbar‘ nichts anderes, als daß in sehr wei- 
tem Umfange große Eiweiß- und Antigengleich- 
heit besteht, d. h. daß die Reaktionen sehr weit 
reichen. 
Was nun zunächst die Frage nach der unbe- 
dingten Brauchbarkeit der Methoden angeht, so 
mögen hierzu folgende Tatsachen meiner Unter- 
suchungen Erwähnung finden. Bei sämtlichen Un- 
tersuchungen ergaben sich bei keinen unzweifel- 
haften Verwandtschaftsgruppen Ausnahmen. 
Selbst bei Lösungen, die sehr wenig Eiweiß ent- 
hielten, waren in solchen Fällen stets Reaktionen 
zu verzeichnen. Ferner besteht die Tatsache, daß 
mit keiner unzweifelhaft nicht verwandten Gruppe 
Reaktionen eintreten, und schließlich zeugt die 
Reziprozität der Reaktionen für eine Brauchbar- 
keit der Methoden. Es ergab z. B. stets Immun- 
serum von Juglans regia (Walnuß) eine positive 
Reaktion mit den Betulaceae (Birkengewächse), 
Cannabaceae (Hanfgewächse), ebenso zeigte sich 
dann auch reziprok eine solche von Corylus Avel- 
lana (Haselnuß, zu den Betulaceae gehörig) aus 
zu den Juglandaceae wie auch von Cannabis sa- 
tiva zu den Juglandaceae. 
Damit war die Brauchbarkeit erwiesen, und es 
handelte sich nun darum zu zeigen, daß die Me- 
thoden auch ihre praktischen Erfolge zeitigten. 
Erwähnt ist schon, daß das Material ganz an- 
ders zu behandeln ist, als das mit nahezu gleich- 
mäßigem Eiweißgehalt ausgestattete Blut von 
Tieren bei analogen Versuchen in der Hygiene 
und Zoologie. Ich versuchte den Pflanzensamen, 
denn diese kommen als beinahe einzigste Material- 
quelle in Betracht, möglichst alles Eiwejß zu ent- 
ziehen. Es wurden die Samen durch Mörser oder 
Mühle, wobei natürlich eine peinlichste Sauber- 
keit Bedingung war, zerkleinert zu feinstem Mehl, 
das in bestimmten Mengenverhältnissen mit phy- 
siologischer Kochsalzlösung vermischt (auf 1 g 
Mehl 5 ecem NaCl) und einige Zeit (etwa 
'/s Stunde) extrahiert wurde. Der Extrakt, der 
je nach dem Eiweißgehalte des Samens verschie- 
denen Gehalt an Eiweißstoffen hatte, was durch 
Albumimeter nach Esbach nachgewiesen wurde, 
diente nun sowohl zur Injektion, wie zur Unter- 
suchung, nur mit der Abänderung, daß für letztere 


