






ganz bedeutend stärkere Verdünnungen verwendet 
vurden. Da die so gewonnenen Eiweißlösungen 
_tritbe waren, so wurden sie filtriert, und zwar 
durch Doppelfilter, bis sie ganz klar wurden. Es 
braucht auch hier nur hervorgehoben zu werden, 
daß sämtliche Gefäße steril gemacht waren, und 
auch bei Herstellung der Extrakte sterile Koch- 
 salzlösung Verwendung fand wie größte Sau- 
_berkeit der Samen beobachtet wurde. 
Hierbei zeigten sich nun die gerade as pflanz- 
liche Samen charakteristischen Nebenerscheinun- 
gen, die das zu analogen Versuchen verwendete 
Blut von Tieren nicht aufweist. Zunächst ist es 
_ wichtig, möglichst frische Samen zu verwenden, 
weil das Eiweiß in ihnen, nach meinen Unter- 
_ suchungen, am meisten reaktionsfähig ist, obwohl 
auch Samen, die sehr lange (sogar bis 20 Jahre) 
"gelegen hatten, sich zuweilen als brauchbar 
_ erwiesen. Es treten jedoch in den Samen ver- 
schiedene Stoffe auf, von denen man annehmen 
muß, daß sie für den Tierkörper bei der Injektion 
von Nachteil sein, ja den Tod der Tiere herbei- 
führen müssen. Die vorhandenen Fette und Öle 
wurden durch Alkohol und Äther zu extrahieren 
_ versucht und zum Teil auch mit gutem Erfolge. 
Um die in verschiedenen Samen vorhandenen 
Säuren und Gifte (z. B. Alkaloide) sowie die nicht 
_ antigenwirkenden Stoffe wie Stärke, Glykogene, 
Zucker usw. zu entfernen, versuchte ich erstere 
durch Hinzufügen von Sodalösung zu neutrali- 
sieren, während andere Stoffe, unter ihnen die 
_ Alkaloide, wohl schon zum größten Teil durch die 
Vorbehandlung mit Alkohol entfernt waren. Die 
in den Lösungen vorhandenen Salze, zum Teil auch 
Säuren und andere wasserlösliche Substanzen 
wurden bis auf unwesentliche Reste durch Dia- 
lyse entfernt. 
Gleichwohl wird es nicht immer gelingen, 
_ sämtliche schädlichen Stoffe auf derartige Weise 
zu entfernen. Es hat deshalb die Frage nach der 
_ Verwendbarkeit eines Untersuchungsobjektes die 
Voruntersuchung nach dem Vorhandensein von 
derartigen Stoffen zur Voraussetzung, und die 
_ Vorbereitung des oben erwähnten Extraktes wird 
deshalb je nach der spezifischen Figenart des 
 Samens eine verschiedene sein. 















Diese gewonnenen Extrakte wurden Kaninchen 
injiziert, die allein für mich als Versuchstiere in 
Betracht kamen. Die Injektion geschah entweder 
_ intravenös, d. h. in die Ohrvene, oder intraperi- 
 toneal, also in die Unterbauchgegend, jedoch ver- 
wendete ich in der Hauptsache die letztere infolge 
ihrer leichteren Handhabung und Sicherheit, die 
Tiere am Leben zu erhalten. Infolge der leichten 
_ Infektionsmöglichkeit, die bei den schwer zu ste- 
_ rilisierenden Injektionsflüssigkeiten aus pflanz- 
 lichem Material gegeben ist, können bei intravenö- 
ser Injektion zu leicht Erkrankungen und Ver- 
_ luste von Tieren mit oft schon kostbarem Serum 
_ eintreten, während das Bauchfell relativ un- 
_ empfindlich gegen Infektionserreger sich erweist. 
Gohlke: Die Serumdiagnostik im Dienste der Pflanzensystematik. 407 
Die Dosierung des Impfmaterials richtete sich 
naturgemäß nach dem Eiweißgehalte des Extrak- 
tes wie auch die Häufigkeit der Injektionen be- 
dingt war durch den Gesundheitszustand des ge- 
impften Tieres. In der Regel betrug bei meinen 
Versuchen der Zwischenraum zwischen den einzel- 
nen Injektionen 3—4 Tage. 
Was die Dauer der Immunisierung angeht, so 
kann eine genaue Zeit auch hier nicht gegeben 
werden. Nach 3—4 Injektionen kann zuweilen 
schon ein hochwertiges Immunserum erzeugt wer- 
den, bei jeweiliger Injektion von 10 ccm Extrakt, 
aber es liegen auch Fälle vor, wo bei relativ hohem 
Eiweißgehalte noch nach 10 maliger Injektion sehr 
wenig Immunität eingetreten war, ja zuweilen 
eine solche ganz unterblieb. Es zeigt sich nämlich, 
daß die Individualität des Tieres ein nicht zu 
unterschätzender Faktor ist, und es scheint zweck- 
mäßig, gleichzeitig mehrere Tiere mit demselben 
Eiweiß zu impfen. Uhlenhuth erwähnt z. B., daß 
er von 10 gleichzeitig mit demselben Eiweiß in- 
jizierten Kaninchen nur ein einziges mit hoch- 
wertigem Immunserum erhalten hat. Um sicher 
zu gehen, ist eine Untersuchung auf die Immuni- 
tätshöhe eines Serums nach 3—4 Injektionen vor- 
zunehmen. 
» Dieses geschieht leicht durch die Probe- 
blutentnahme, die dadurch herbeigeführt wird, 
daß aus dem mit Alkohol gereinigten Öhre 
des Kaninchens, und zwar aus der Randvene des- 
selben, eine kleinere Blutmenge entnommen wird. 
Die Untersuchung geschieht am besten mit Hilfe 
der Präzipitation, indem das durch Zentrifugieren 
aus dem Blut gewonnene Serum mit dem Ex- 
trakte, der zur Injektion benutzt wurde, zusam- 
mengebracht wird. Es zeigt dann ein Nieder- 
schlag, das Präzipitat, ob das Serum hochwertig, 
und somit brauchbar, ist oder nicht. Hat eine 
solche Brauchbarkeit desselben sich herausgestellt, 
so wird das Tier zu 24stündigem Hungern von 
den anderen Tieren isoliert, und am nächsten 
Tage geschlachtet. Die Blutentnahme geschieht 
möglichst steril und in sterilen Gefäßen durch 
Karotidenschnitt. Das gewonnene Serum muß 
nun, um als brauchbar und einwandfrei Verwen- 
dung zu finden, die Eigenschaften zeigen, daß es 
spiegelklar sich ‘erweist, es darf weiter keine Opa- 
leszenz zeigen, eine Eigenschaft, die häufig auf- 
tritt, über deren Entstehung es einstweilen 
keine befriedigende Erklärung gibt, und schließ- 
lich darf das Serum kein freies Antigen enthalten, 
d. h. es ist darauf zu achten, daß das Tier nicht 
zu früh nach der letzten Injektion geschlachtet 
wird. 
Das Serum ist, wenn es absolut steril ist, 
dann leicht zu konservieren in dunklen Gläschen, 
die mit steriler Watte verschlossen sind. Bei dem 
Fintrocknen von Serum zu Pulver oder auf 
Papier habe ich besonders gute Erfolge nicht er- 
zielen können, denn bei derartiger Behandlung 
verliert das Serum an Wertigkeit. Gerade dieses 
ist für die Untersuchungen ein unersetzlicher 
