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leicht möglich, daß die Unstimmigkeiten nur auf 
Versuchsfehlern beruhen. Jedenfalls zeigen die 
Versuche, daß unzweifelhaft eine feste Beziehung 
zwischen der Konzentration der Eiweißionen und 
dem Grad der Verdauung der Eiweißkörper be- 
steht. Dieses Resultat ist durchaus zu erwarten, 
da im allgemeinen der Grad der Reaktion eines 
Tons von dem Grade der Reaktion eines unioni- 
sierten Moleküls verschieden ist. Zu erwähnen 
ist noch, daß die Hydrolyse der Gelatine durch 
Säuren und Alkalien erkennen läßt, daß die un- 
ionisierten Moleküle leichter durch diese Agen- 
tien angegriffen werden als die ionisierten (15). 
Einfluß der Änderung der Substratkonzentration. 
Es war zu erwarten, daß die Annahme, die 
Eiweißkörper würden durch Jonisierung angreif- 
bar für die Enzyme, dazu dienen könnte, abnorme 
Wirkungen der Substratkonzentration zu deuten, 
und das ist wenigstens zum Teil wahr im Falle 
des Pepsins und des Eieralbumins. Es wurde 
gefunden, daß die Zunahme im Grade der Ver- 
dauung mit zunehmender Eiweißkonzentration 
annähernd gleich war mit der Zunahme der 
Proteinionen, wie sie durch Leitfähigkeitsbestim- 
mungen ermittelt wurde, und daß diese Überein- 
"stimmung besser war als diejenige mit der totalen 
Eiweißkonzentration. Bei Trypsin und Gelatine 
(14) stimmt das nicht, und die Anomalie ist hier 
nur teilweise ausgeglichen. Der Grad der Ver- 
' dauung wächst viel langsamer als die Gelatine- 
konzentration und ist von 3% an fast umabhängig 
von ihr. Dieses Verhalten wird bei verschiedenen 
Enzymen gefunden und wird im allgemeinen als 
„Sättigung“ des Enzyms mit dem Substrat auf- 
gefabt. Henri, Michaelis und van Slyke haben, 
ausgehend vom Massenwirkungsgesetz, Glei- 
chungen abgeleitet, welehe mit den Resultaten 
unter der Annahme einer Verbindung zwischen 
Enzym und Substrat übereinstimmen. Es 
scheint jedoch kein direkter Beweis für 
solche Verbindung vorzuliegen, und es gibt, so 
weit ich sehe, bei der homogenen Katalyse keinen 
Beweis für das Vorhandensein einer nachweis- 
baren Menge einer solchen intermediären Ver- 
bindung. In manchen Fällen von Wasserstoff- 
ionenkatalyse ist es jedenfalls bekannt, daß keine 
meßbaren Quantitäten von Wasserstoffionen 
irgendwann gebunden werden, obgleich der Ein- 
fluß der Zunahme der Substratkonzentration ab- 
norme Resultate tatsächlich bei allen katalyti- 
schen Reaktionen verursacht. Es ist äußerst 
wahrscheinlich, daß einige Typen intermediärer 
Verbindungen bei allen katalytischen Reaktionen 
existieren, wie Falk (13) behauptet hat. In 
diesem Falle ist nicht die Frage, ob eine solche 
Verbindung existiert oder nicht, sondern ob sie 
in genügender Menge existiert, um für die 
Kinetik der Reaktion als entscheidender Faktor 
in Frage zu kommen. Es ist häufig festgestellt 
worden, 
setzung schützt und sich dann mit ihm verbindet. 
substanz wurde 
eine > 
daß das Substrat das Enzym vor Zer-- 









































Sobald man Bee, das Base zum Sub rat zu- 
fügt, wird das Substrat unter Bildung von Si 
stanzen gespalten, welche unzweifelhaft das Enzym 
schützen, und’ der beobachtete Einfluß ‚beruht 
nach meiner Ansicht auf diesen Produkten und 
nicht auf dem Substrat. Das wird aus der Tat- 
sache entnommen, daß Gelatine praktisch in den 
ersten zwei oder drei Minuten keine Schutz- 
wirkung auf Trypsin ausübt (8). Die Schutz- 
wirkung nimmt dann schnell zu. Das ist zu er- 
warten, wenn die Wirkung auf den Reaktions- 
produkten beruht, während die W irkung mit der 
Zeit immer mehr abnehmen müßte, wenn es sich“ 
um eine Wirkung des Substrates selbst handeln. — 
würde. 
Im ersten Teile dieser Arbeit wurde gezeigt, © 
daß die Existenz einer Verbindung zwischen dem ~ 
Enzym und den Hemmungssubstanzen sehr gut — 
bewiesen ist. Wenn das Enzym sich auch mit — 
dem Substrat verbinden würde, müßte das Gleich- — 
gewicht zwischen dem Enzym und der Hemmunes- — 
substanz durch Zunahme der Substratkonzentra- 
tion beeinflußt werden. Das ist aus der folgen- 
den Gleichung ermittelt, welche annimmt, daß — 
das Enzym sich sowohl mit dem Substrat als 
auch mit der Hemmungssubstanz verbindet: 
+ Substrat Z Enzym — Substrat 
Enzym Grito : a 
+ Hemmungssubst. Enzym— Hemmungssubst. a 
a 

Bei Zunahme der  Substratkonzentration 
müßte das Gleichgewicht sich in der Richtung — 
des großen Pfeiles verschieben, d. h. der Einfluß 
der Hemmungssubstanz müßte geringer werden. 
Das ist jedoch nicht der Fall (14). Die pro- 
zentuale Inaktivierung einer konstanten Menge 
Trypsin bei einer konstanten Menge Hemmungs- 
unabhängig von der Substrat- — 
konzentration befunden. N 
Die Annahme einer Einzym-Substrat-Verbin- — 
dung kann auch auf anderem Wege bewiesen. wer- 
den. Wenn das Trypsin mit Gelatine in einer — 
größeren Konzentration als 3% gesättigt ist, kann 
es nicht zu derselben Zeit ein anderes Protein | 
hydrolysieren. Jedoch wenn Casein zu solch — 
einer Losung hinzugefiigt wird, findet man, daß 
das Casein im gleichen Grade hydrolysiert wird, — 
als wenn die Gelatine nicht vorhanden wäre. Mit — 
anderen Worten, der Grad der Hydrolyse einer i 
Lösung von Casein und Gelatine schreitet 
selben Maße vor, wenn beide Reaktionen SR = 
ausgeführt werden oder im gleichen Gefäße. — 
Dieses Resultat wird in Fig. 7 und. Tabelle IE 
erläutert (14). ‘ 
‚Man muß natürlich die Zeiten vorahetohian 4 
welche zur Spaltung einer gegebenen Menge 
Eiweiß notwendig sind, und nicht die Mengen, 
welche in einer gegebenen Zeit gespalten werden, 
da sonst die Menge der gebildeten Hemmungs- | 
substanz in dem einen Falle größer ist als indem 
andern und infolgedessen der Einfluß auf das 
Enzym ein verschiedener ist. Die obige Methode 
des Beweises einer Katalysatorverbindung wurde — 
