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Über etwaige Änderungen der Struktur und 
er Konzentration dieser Verbindung muß man 
zu entscheiden suchen, indem man die wichtigsten 
Faktoren, von denen die Reaktionsgeschwindig- 
| keit abhängt, variiert und die mit den verschie- 
densten ‘ Enzymlösungen gewonnenen Ergebnisse 
| miteinander vergleicht. Es hat sich dabei gezeigt, 
daß keine wesentlich verschiedene Abhingigkcit 
. von,der Temperatur und der [N*] durch die heute 
-abtrennbaren Freindstoffe bewirkt wird. Unab- 
| hängig vom Reinheitsgrade (12), beträgt der Pa- 
| rameter der Saccharase-py-Kurven in Überein- 
| stimmung mit den Angaben der Literatur 
| 6,640.1 bei 30°. Denselben Befund haben 
FA. ». Buler und K. Myrbäck (13) mit ihren nach 
2 den Willstätterschen Sorptionsmethoden gereinig- 
ten Präparaten aus schwedischer -Brauereihefe 
| erhoben. Auch die Schwankungen des Tempera- 
| turkoeffizienten, den R. Willstatter, J. Graser 
und ich (12) für Invertinlésungen von verschie- 
| dener Herkunft und weit differierendem Rein- 
| heitsgrade zwischen 15,5 und 30° bestimmt 
2 haben, bewegen sich nur innerhalb der Versuchs- 
| fehler. % 
|. Ausschlaggebend für die Beziehung der In- 
| -vertinmengen zu den Inversionsgeschwindigkeiten 
a und damit für die Entscheidung über die Spezifi- 
} tat dieses Enzyms ist die Berücksichtigung der 
| wechselnden Abhängigkeit der Reaktionsge- 
|. schwindigkeiten von der Zuckerkonzentration, die 
po wechselnde Affinität des Enzyms zu seinem 
| Substrat. 
3 Die Unterschiede der scheinbaren Dissozia- 
| tionskonstanten der Saccharase-Saccharose-Ver- 
ı "bindungen, die sich für Invertinlösungen und 
| -präparate der ‚verschiedensten Herkunft er- 
| gaben (14), betragen bis zu 250% des klein- 
| sten numerischen Wertes. 

(ee RN » ss 
| der einzelnen K,-Bestimmungen beträgt dem- 
_ gegenüber nicht mehr als +5%. In Tabelle I 









| Messungen, die mit Saccharas¢lésungen aus 
/ nischen Brauerei- und Brennereihefen angestellt 
wurden. In der dritten Kolumne steht das Re- 
ziproke von K,, die Affinitätskonstante, in der 
vierten derjenige Bruchteil des vorhandenen En- 
zyms, der unter den Bedingungen der üblichen 
Zeitwertbestimmung (in 0,1387 n-Lösung) an 
- Zucker gebunden ist. 
| und 77,5 %. 

Tabelle I. | 
en gebundene 
Invertin Ks As Saccharase 
: = (9/5) 




Er snneräthers Rasse XII .. 

Brennereihefe Kopenhagen | 0,017 
| Amerikanische Brauereihefe)| 0,020 50 87,5 
Münchener Löwenbräuhefe | 0,029) 35 82,5 
Münchener Löwenbräuhefe 0,040. 25 | 77,5 


Der mögliche Fehler 
| bayerischen, preußischen, dänischen und amerika- 
-mir (15). die 
Er schwankt zwischen 89,5 © 
N ee 4 7 
glykosidspaltender Enzyme. 

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Deutung dieser Verschiedenheiten wäre die fol- 
sende: Kommt zum System Saccharase-Rohr- 
zucker noch ein dritter Körper hinzu, welcher 
einen Teil des freien Enzyms zu binden und da- 
durch der Vereinigung mit dem Rohrzucker zu 
entziehen vermag, so muß dadurch die scheinbare 
Dissoziationskonstante erhöht, ihr reziproker 
Wert, die Affinität des Enzyms zum Zucker, er- 
niedrigt werden. Entspricht die Beziehung des 
Enzyms zu diesem Körper K einem Dissoziations- 
gleichgewicht im Sinne der Gleiehung 
E+KS(ER) >. Be 
wobei dem Komplex (EK) keinerlei katalytische 
Wirkung mehr zukommt, so folgt aus dem 
Massenwirkungsgesetz, daß die Dissoziationskon- 
stante RE mal größer erscheinen wird, 
wenn K die Konzentration des Hemmungs- 
körpers und Kx die Dissoziationskonstante des 
Gleichgewichts (1) bedeutet. Die Extrapolation 
der Reaktionsgeschwindigkeiten für unendlich 
hohe Zuckerkonzentration wird in diesem Falle 
den Vergleich der jeweils vorhandenen Saccha- 
rasemengen ermöglichen, weil unter diesen Be- 
dingungen der Hemmungskörper mit dem Rohr- 
zucker nicht mehr erfolgreich um die Saccharase 
konkurrieren kann. 
Dank den bahnbrechenden Untersuchungen 
von S. P. L. Sorensen, L. Michaelis, P. Rona und 
ihrer Schiiler hat man schon vor mehr als zehn 
Jahren die Bedeutung der Wasserstoffionenkon- 
zentration für biologische Vorgänge erkannt 
und hat in bezug auf diese stets prozentisch 
gleiche Teile der maximal möglichen enzymati- 
schen Reaktionsgeschwindigkeiten verglichen. 
Heute erst lernen wir den in dieser Hinsicht weit 
entscheidenderen Einfluß der Substratkonzen- 
tration kennen. 
Es erscheint somit als eine der Vorbedingun- 
gen für die Proportionalität von Saccharasemenge 
und Inversionsgeschwindigkeit, daß man die Mes- 
sungen auf solchen Punkten der Aktivitäts-py- 
und der Aktivitäts-p,-Kurven vornimmt, welche 
gleiche Ordinaten haben. Dieselbe Näherung läßt 
sich erreichen, indem man (z. B. für den Vergleich 
von bayerischem und amerikanischem Invertin) 
nach einem Vorschlage von FR. Wallstätter und 
Reaktionskonstanten oder die 
Saccharasewerte, welche ein Maß der Enzym- 
mengen darstellen, auf ein Invertin von der mitt- 
leren Affinitätskonstante 50 umrechnet, -also 
n+K; 
n +0,02. 
wenn die Inversion in n-normaler Lösung ver- 


durch Multiplikation derselben mit 
> folgt wurde. 
Für die Zeitwertquotienten ergibt sich, daß 
sie bei einem Enzym von wechselnder Zucker- 
affinität ebenso differieren können, wie wenn sie 
mit einer bestimmten Enzymlösung bei verschie- 
dener Normalität der Substrate ermittelt und 
miteinander verglichen würden. Hierbei ist aber 
