_ Raffinose identisch. 
von Kg ist auch Kp verschieden, 
| 
 tionskonstanten, der Affinitätsquotient 
“als konstant. 
Stimmen zwei Ne in ihrer Affi- 
 nität zum Rohrzucker überein, so ist nicht nur 
ihre Affinität zur Raffinose gleichfalls überein- 
stimmend, sondern es ist auch das Verhältnis der 
Pll ydrolysengeschwindigkeiten von Rohrzucker und 
Nur bei Verschiedenheit 
und nur in 
diesem Falle differieren die iW btyreriaiatien ten: 
_Weit innerhalb der Fehlergrenzen erweist sich 
auch das Verhältnis der scheinbaren Dissozia- 
Kr ; Kg 
Er beträgt im Mittel aus allen 
Messungen 16. Und es zeigt sich, daß der für 
unendlich hohe Auckerkonzentratiön extrapolierte 
_ Zeitwertquotient Qe, den man als das Verhält- 
nis der Zerfallsgeschwindigkeiten der Saccharase- 
Saccharose- und der Raffinase-Raffinose-Verbin- 
_ dungen deuten kann, konstant ist und als Mittel- 
wert 1,9 ergibt. 
Aus der eingangs erwähnten Annahme von der 
Anwendbarkeit des Miassenwirkungsgesetzes läßt 
sich der mathematische Beweis erbringen, daß 
unter. diesen Umständen das molare Verhältnis 
von Saccharase und Raffinase 
 schwankenden Zeitwertquotienten für jede unter- 
ungeachtet der 
| suchte Enzymlösung dasselbe sein muß, und es 



- mehr freies Enzym 
| Zeitwertquotienten ergibt sich u. a.: 
scheint mir nicht zu kühn, daraus auf die Iden- 
y titat beider Enzyme zu schließen. 
Die Ausbildung absolut spezifischer Enzyme 
in der Natur geht also nicht so weit, als gelegent- 
lich angenommen wurde. Die Eimympräpärete, 
die wir in Händen halten, erscheinen nicht mehr 
als unentwirrbares Gemisch. Sie sind bedeutend 
einheitlicher, als wir es lange Zeit gedacht. 
Wir erhalten zum ersten Male ein Bild von 
der „relativen Spezifität“ eines Enzyms zu zwei 
Zucekern: Denken Sie sich die reine Ronrzucker- 
‘Invertin- und Raffinose-Invertin-Verbindung in 
Wasser von 30 °‘zu solcher Konzentration gelöst, 
daß von den undissoziierten Enzym-Substrat-Ver- 
bindungen je 1 Mol im Liter enthalten ist. Dann 
haben Sie neben dem Trisaccharid Y 16=4 mal 
in Lösung, als neben deın 
Disaecharid und für jedes in Fructose und Meli- 
‘biose gespaltene Raffinosemolekül werden in der 
_ gleichen Zeit etwa zwei Rohrzuckermoleküle in 
_ Fructose und Glykose zerfallen. 
Der gesetzmäßige Zusammenhang von Saccha- 
-rase- und Raffinasewirkung erlaubt zum ersten 
Male enzymatische Reaktionsgeschwindiekeiten 
im voraus aus anderen zu berechnen, die Bestim- 
mung der Zeitwertquotienten durch Affinitäts- 
messungen zu ersetzen und umgekehrt aus der 
Kenntnis eines Quotienten auf die Dissoziations- 
konstanten der Enzym-Zucker-Verbindungen zu 
schließen. Solche Berechnungen, von denen ich 
eine größere Anzahl angestellt habe, haben mit 
den nachträglich direkt experimentell ermittelte‘ 
Werten innerhalb der Versuchsfehler ern 
‚stimmt. 
Aus der mathematischen Betrachtung der 
wenn einem 
Nw. 1928. 

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Enzym neben seiner Hauptwirkung, worunter ich 
die Hydrolyse desjenigen Substrates verstehe, zu 
dem es die größte Affinität besitzt, noch ein oder 
mehrere Nebenwirkungen zukommen, so hat der 
Wendepunkt der Quotientenkurven, durch die die 
Abhängigkeit der Zeitwertquotienten von der 
Substratkonzentration dargestellt wird (Q in 
Fig. 3), immer dieselbe Abszisse wie der Wende-- 
punkt der Haupt-p,-Kurve. Diese Beziehung 
wird die vervollständigende Beschreibung der In- 
vertinwirkungen experimentell vereinfachen. Das 
Invertin der Hefe scheint nämlich außer dem 
Rohrzucker und der Raffinose noch eine Reihe 
seltenerer Zuckerarten anzugreifen, wie z. B. die: 
Gentianose der Enzianwurzeln, die aus zwei Mo-- 
lekülen Glykose und einem Molekül Fructose auf- 
gebaut ist, die Stachyose, in der an den Galak- 
toserest der Raffinose ein zweites Galaktosemole- 
kül herangetreten ist, die Verbascose, den Zucker 
der Königskerze, und einige andere. Mit Unrecht. 
zählt man aber hierher das Lävulin der Kompo- 
siten. Es stellt ein Gemenge von Kohlehydraten 
dar (18), aus dem ich Rohrzucker in kristallisier- 
tem Zustand abgeschieden habe. Die Behaup- 
tung, daß diese Fructoside vom Hefeinvertin ge- 
spalten werden können, werde ich heute noch auf 
andere Weise zu stützen haben. 
Man wird mit Recht bezweifeln, ob die Iden- 
tität von Saccharase und Raffinase das Bild der 
enzymatischen Erscheinungen wesentlich verein- 
facht. -Scheint doch die Annahme dieser zwei 
Enzyme ersetzt worden zu sein durch eine außer- 
ordentliche Vieiheit von Invertinen. 
Ich habe nun den Vergleich des Invertins ver- 
schiedener Herkunft ergänzt durch den Vergleich 
der Affinitäten, den ein bestimmtes Invertin, 
z. B. das der Löwenbräuhefe, bei wechselndem 
Reinheitsgrade zum Rohrzucker aufweist und habe 
eefunden, daß in Übereinstimmung mit der Kon- 
stanz des Zeitwertverhältnisses für die Spaltung 
von Rohrzucker und Raffinose die Dissoziations- 
konstante der Invertin-Rohrzucker-Verbindung 
von den rohen Autolysaten der Hefe bis zu Prä- 
paraten von mehr als 1500facher Konzentration, 
in denen wir kein Kohlehydrat und keinen Phos- 
phorgehalt mehr nachweisen können, konstant 
bleibt (14). 
Diie ihrer Zusammensetzung nach bekannten 
Begleiter des Invertins, die zu den Klassen der 
Proteine, der Nucleine und Zuckerarten gehören, 
vermögen also die Affinität des Enzyms zum 
Rohrzucker nicht zu beeinflussen. Und doch sind 
die Fermentteilchen mit all diesen Stoffen aufs, 
innigste assoziiert. Diese sind es Ja, welche das. 
wechselnde Verhalten des Enzyms gegen Sorp- 
tionsmittel, das wechselnde Verhalten im elek- 
trischen Stromfelde, die Fällbarkeit durch 
Schwermetallsalze, das ultramikroskopische Bild 
der Lösungen und so viel anderes bedingen (12). 
Man muß allerdings berücksichtigen, daß die 
Beobachtung von R. Willstätter und H. Kraut 
(19) über die Leichtiekeit, mit der diese Asso- 
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