ziationen durch bloßes Verdünnen der Bar 
lösungen gelockert werden können, es möglich er- 
‚scheinen läßt, daß uns der Einfluß der Begleit- 
stoffe nur deshalb entgeht, weil diese Komplexe 
unter den Bedingungen der Zeitwertbestimmung 
— bei durchschnittlich 100facher Verdünnung — 
zerfallen und weil sich die geringe Affinität der 
Begleitstoffe neben dem ungeheueren Rohrzucker- 
überschuß nicht Geltung verschaffen kann. Vor 
zwei Jahren hat aber R. Willstätter mit mir (5) 
gezeigt, daß es Sorbate gibt, die bei der Einwir- 
kung auf Rohrzueker nicht im geringsten zerlegt 
werden, z. B. Tonerde-Invertin bei Acetatpuffe- 
rung. Denselben Befund haben gleichzeitig zwei 
amerikanische Forscher, J. M. Nelson und D. J. 
Hitchcock (20) für Invertin, das sie auf Kohle 
niedergeschlagen hatten, mitgeteilt, und sie haben 
unsere Beobachtung bestätigt, daß unter gewissen 
Bedingungen das an die Oberfläche der Tonerde 
bzw. Kohle gebundene Enzym quantitativ genau 
so wirkt wie in wassriger Lösung. 
Die zusammenfassende Betrachtung der über 
das Invertin vorliegenden Beobachtungen hat 
R. Willstatter, J. Graser und mich. (12) vor 
‚einem Jahre zu der Anschauung geführt, daß das 
Enzym aus einem kolloiden Komplex besteht, 
-dessen aktive Gruppen rein chemisch wirken. Die 
Konstanz der Rohrzuckeraffinität zeigt nun, daß 
die natürlichen Verunreinigungen der Invertin- 
lösungen nach Art der Tonerde und der Kohle 
nur mit dem kolloiden Komplex selbst verankert 
sein können und daß gewisse in der Wirkungs- 
sphäre des kolloiden Trägers sich abspielenden 
Vorgänge durch räumliche Trennung für die 
wirksamen Gruppen des Enzyms unbemerkt 
bleiben. Es ist eim polarer Bau der Ferment- 
-teilchen, -den uns die Reaktionen des Invertins 
kundtun. Sie erinnern an andere Erscheinungen 
-der räumlichen Orientierung solcher Gebilde an 
Phasengrenzflächen, wie sie als erster J. Lang- 
muir (21) genauer beschrieben hat. Langmuir 
hat gezeigt, daß bei der Anreicherung einer Fett- 
säure an der Grenzfläche Wasser-Luft die Mole- 
‘kiile nicht beliebige Lagen einnehmen, sondern 
daß der „wasserunlösliche Teil des Molekiils“, der 
Kohlenwasserstoffrest, in die 
liegen kommt und daß die wasserlöslichen Carb- 
oxylgruppen ins Innere der Flüssigkeit gerichtet 
sind. Er konnte den von jedem Molekül einge- 
nommenen Betrag der Oberfläche berechnen, der 
sich z. B. bei Glyceriden als dreimal so groß er- 
-wies als bei der entsprechenden Fettsäure. 
Wenn beim Invertin-Tonerde-Sorbat die wirk- 
samen Gruppen des Enzyms ins Innere der 
Flüssigkeit tendieren, so scheinen sie in gewissen 
Schwermetallsalzfällungen umgekehrt die ~ Ver- 
-ankerung des Enzyms zu bewirken. Ich glaube, 
daß das Bild, das ich eben vom Bau der Invertin- 
-teilchen entworfen habe, 
Langmuirs eine Brücke schlägt zu jenem Reich 
-der Erscheinungen, wo die durch getrennte Aus- 
Jbildung chemischer Gruppen bedingte verschieden- 
die gleiche, und es scheinen demnach die rohr- 
Hemmungskorpern nicht streng richtig sein kann 
Oberfläche zu 
"Affinität zur Saccharose ist, um so stärker wird 
von den Versuchen- 










































meine damit die a die Vorstellung 
über haptophore und toxophore Gruppen, über ( 
Beziehung der Toxine zu ihren Antikörpern, 
sie P. Ehrlich (22) entwickelt hat. 
Ich komme auf die Frage nach der Identi 
der Invertine, die wir in verschiedenen Hefe 
rassen antreffen, zurück, auf die wichtige Frag 
ob einem Enzym überhaupt eine charakteristische 
und konstante Affinität zu seinem Substrat zu- 
kommt, ob sich die Verschiedenheiten der Ak- 
tivitäts-ps-Kurven durch wechselnde Mengen 
von Fremdkörpern erklären lassen- Es hat 
sich gezeigt (14), daß diese Verschiedenheiten 
durch kochbeständige Begleiter des Enzyms her-. 
vorgerufen werden, die ihm in ihrer chemischen 
Eigenart verwandt sein mögen und für deren Ab- 
trennung es bis heute noch keine Möglichkeit 
gibt. Es gelingt nämlich durch Zusatz gekochter 
Invertinlösungen zu. einem wirksamen Invertin 
von hoher Affinität dieselbe herabzudrücken. 
Eine Erhöhung der Affinität (z. B. durch V 
mischen einer Invertinlösung mit einem Koc 
saft, in dem das Enzym vor dem Erhitzen eine 
doppelt so große Affinität zum Rohrzucker besaß) 
wurde nicht beobachtet. Beim Arbeiten mit 
großem Überschuß an Kochsäften gelingt es, alle 
hochaffinen Invertinlösungen auf gleich niedrige 
Affinität zu bringen, welehe 30 #2 beträgt. Im 
übereinstimmenden Milieu der Begleitstoffe er- 
weist sich somit die Affinität zum Rohrzucker als 
zuckerspaltenden Enzyme der verschiedenen Kul- 
turhefen, die ich untersucht habe, identisch zu 
sein. Zugleich geht daraus hervor, daß die frühere 
Annahme über die Beziehung des Enzyms zu den | 
und daß der Prozeß (1) wenigstens en auch 
irreversibel verläuft. Die Assoziation mit dem! 
Körper K führt nicht zu einem katalytisch un- 
wirksamen Komplex (EK), wohl aber zu einem 
solehen von geänderter Reaktionsfähigkeit. | 
Die scheinbare Affinität des Enzyms zu einem 
Trisaccharid wird nun durch diese Assoziationen 
stärker erniedrigt als die zu einem Disaccharid, die 
letztere wiederum stärker als die zu den Ha 
Es ist daher zu erwarten, daß die Verschiedenheit 
der Affinität zum Rohrzucker, zu deren Ermitte-- 
lung ausschließlich die Anfangsgeschwindigkeiten 
der Inversion verfolgt wurden, auch im zeitlichen 
Verlauf, in der Kinetik, eines einzelnen Ver- 
suches sich ausdrücken wird. Je geringer die 

die hemmende Wirkung der Spaltprodukte zur 
Geltung kommen, um so flacher wird die Kinetik 
sein. Dies ist durch die Versuche vollauf bestätigt 
worden. Die Unzahl von Widersprüchen, die sich. 
in der Literatur über den zeitlichen Verlauf der 
enzymatischen Rohrzuckerhydrolyse finden, und 
die R. Willstatter, J. Graser und ich bei Unter- 
suchung der qeingien Invertinlösungen un auf 
