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Le liquide est donc assez fortement acide. 
Or, pendant la stérilisation à l’autoclave, la tempéra- 
ture monte à 120° C., et cette température élevée est 
maintenue pendant dix minutes. Il est donc probable que 
c’est l'acide tartrique qui, à cette haute température, agit 
sur la raffinose pour donner du sucre réducteur. 
Plusieurs essais entrepris dans un but de vérifi- 
cation démontrèrent l'exactitude de cette hypothèse. 
Différentes portions de solutions nutritives furent exa- 
minées avant stérilisation : absence complète de sucre 
interverti. 
L'examen fait après stérilisation permit de constater 
la présence d’un tiers environ de sucre réducteur. 
Pour permettre de tirer une conclusion à l'abri de tout 
reproche, il faut obtenir après stérilisation un liquide 
nutritif contenant toute la raffinose sous forme de rafh- 
nose non réductible, et non plus une solution renfermant 
et de la raflinose et du sucre réducteur. 
Il faut donc empêcher l’inversion de là raffinose pen- 
dant la stérilisation, et pour cela, deux procédés peuvent 
être employés : 
1° Avant stérilisation, neutraliser exactement l’acidité 
du liquide de culture en ajoutant du carbonate de chaux 
ou de magnésie qui se dépose au fond du vase. La stéri- 
lisation peut alors se faire à l’autoclave sans crainte 
d'inversion. 
2 Stériliser le liquide à froid à l’aide de la bougie 
Chamberland. 
