Die Serodiagnostik in der botanischen Verwandtschaftsforschung. 445 
| | Zeigte nach wiederholter Filtration der Sameneiweißauszug noch eine 
‚ Trübung, so wurde er im Seitz-Apparat durch ein K-Filter (Klärungsfilter) 
| filtriert. In diesem Fall ist es jedoch nötig, den Eiweißgehalt des Filtrates 
| erneut nachzuprüfen. 
| Große Schwierigkeiten bereitete uns im Anfang die Beseitigung des 
‘Schleims aus unseren Auszügen schleimhaltiger Samen. Wir versuchten 
den Schleim durch Zentrifugieren und nachfolgendes Abgießen von der Ei- 
‚ weißlösung zu scheiden, was jedoch nur unvollkommen gelang. Bedeutend 
‚besser erreicht man dies durch fraktionierte Filtration. Da der Schleim 
erst gegen Ende der Filtration das Filter passiert, so unterbrechen wir die 
Filtration vor diesem Zeitpunkt und trennen so den Biveibauszug von dem 
mit in Lösung gegangenen Schleim. 
Oft erzielen wir durch physiologische oder 5 % ige Kochsalzlösung bei 
| Zimmertemperatur und halbstündigem Stehenlassen aus dem Samenmaterial 
keine Lösung des Eiweibes. Wir lassen dann die Samen bis 6 Stunden 
und eventuell bei gelinder Wärme ausziehen. Ist auch dies vergebens, 
so wird statt Kochsalzlösung 0,1—1 %ige Natronlauge verwendet. Die 
‚0,1% ige Natronlauge kann man, ohne vorher zu neutralisieren oder zu 
‚ verdünnen, unbedenklich in die Venen oder ins Peritoneum der Versuchs- 
| tiere injizieren. 
Um eine gewisse Sterilität unserer Impflösungen zu erzielen, werden 
‚sämtliche zur Antigenbereitung benutzten Lösungen, sowie die Haze nötigen 
‚ Gefäße sterilisiert; wir sind uns aber im Klaren, daß ein wirklich steriles 
Arbeiten unmöglich ist, da wir das Samenmaterial nicht sterilisieren können. 
Aus diesem Grunde ist es auch mit wenigen Ausnahmen unmöglich, 
ı die Antigene länger als 24 Stunden aufzubewahren, da sich nach dieser 
Zeit die Antigene trüben und unbrauchbar werden. 
| Wir haben zwar versucht, durch Filtration mit dem Seitz-Apparat 
hunter Verwendung von EK-Filtern (Entkeimungsfiltern) unsere Antigene zu 
| sterilisieren und damit haltbar zu machen. Doch mußten wir von dieser 
| Methode absehen, da das gelöste Eiweiß unserer Antigene entweder ganz 
‚oder zum größten Teil von der Filterplatte zurückgehalten wurde. Es ist 
‚also unbedingt notwendig, die Antigene stets frisch zu bereiten. 
(de 
| Immunisierung. 
Mit den so gewonnenen Antigenen impfen wir die Kaninchen. Wir 
| weichen insofern von der Mrezschen Methode ab, als wir die Anzahl der 
Impfungen bedeutend herabsetzen und die der intraperitonealen und intra- 
 venüsen Injektionen in ein anderes Verhältnis bringen. Dies geschieht des- 
halb, weil wir durch wiederholte Probeblutentnahme feststellten, daß der 
‘Titer nach zuviel (iiber 10) Impfungen nicht mehr zunahm, sondern in 
manchen Fallen sogar herunterging. Wir vermeiden auf diese Weise auch 
Botanische Jahrbiicher. LX. Bd. 29 
