448 E. Gilg und P. N. Schürhoff. 
trüben. Wir wenden deshalb in solchen Fällen die bereits erwähnten 
Klärungsfilter von Seitz an. Genügt einmaliges Filtrieren nicht, so muß 
es bis zur spiegelblanken Klärung wiederholt werden. Als Eiweißlösungs- 
mittel benutzen wir physiologische Kochsalzlösung und 0,1—1 %ige Natron- 
lauge. Letztere wird mit Essigsäure später neutralisiert. Die Neutralisation 
wird mit Hilfe von Phenolphthalein als Indikator vorgenommen und mit 
Lackmuspapier nachgeprüft. Es fragt sich nun, in welchem Mengenverhält- 
nis Material und Lösungsmittel zueinander stehen sollen. Wir haben meist 
0,1 g Pflanzenpulver mit 20 ccm Lösungsmittel ausgezogen und so die Ver- 
dünnung 1:200 erhalten. Hierdurch erzielt man Antigene mit sehr ver- 
schiedenem Eiweißgehalt, je nachdem man ein sehr eiweißreiches oder 
-armes Material verwendet, und je nachdem es von anhaftenden Schalen’ 
usw. gereinigt ist. Da aber die Antigene möglichst gleichen Eiweißgehalt 
haben müssen, einmal, um Vergleichswerte zu erzielen, und zweitens, weil 
bei eiweißreichen Antigenen die Normal-Sera weit mitreagieren, muß eine 
Eiweißeinstellung stattfinden. Diese geschieht nach Mrz an Hand einer Ei- 
weißtabelle auf Grund von Essbach-Fällungen. Da jedoch Esssacus Re- 
agenz stark abhängig von der Temperatur ist und außerdem Alkaloide und” 
andere Stoffe mit gefällt werden, bedienen wir uns meist einer Methode, 
wie sie in der Bakteriologischen Abteilung des Reichsgesundheitsamtes tib- 
lich ist. Wir kochen eine Probe der Verdünnung 1 : 200 im Agglutinations- 
röhrchen kurz auf und setzen 2 Tropfen Salpetersäure hinzu. Die allmäh- 
lich auftretende‘ Trübung vergleichen wir mit einer Skala von Normal- 
trübungen, welche auf folgende Weise erhalten werden: 
Eine Verdünnung eines Normal-Kaninchenserums 1 : 100, 1 : 200; 
1:500, 4:1000 usw. wird aufgekocht und ebenfalls mit Salpetersäure 
versetzt; die auftretenden Trübungen werden dann als Normen gebraucht. 
In Ampullen eingeschmolzen halten sich diese einige Tage. 
Entspricht nun z. B. der Eiweißgehalt unseres Antigens 1 : 200 dem 
Eiweißgehalt der Normalverdünnung 4 : 1000, so wird die Antigeneiweiß- 
lösung als 4 : 1000 angesehen, entspricht er aber der Verdünnung 1 : 100, 
so muß das Antigen mit der gleichen Menge Kochsalzlösung verdünnt 
werden, um die Normalverdünnung 1:200 zu ergeben. 
Durch die Essbach-Probe und die Salpetersäureeinstellung läßt sich 
einigermaßen genau der Eiweißgehalt einstellen. Wie wichtig eine solche 
Einstellung ist, zeigt auch die Leipziger Arbeit von Arzt, der einige Gras 
mineen serodiagnostisch untersuchte und zu dem Ergebnis kam, daß eine 
Differenzierung derselben nur nach eingehenden Studien über den Eiweiß- 
gehalt überhaupt möglich ist. 
Haben wir auf diese Art klare, eingestellte Antigene erhalten, so 
werden die weiteren Verdünnungen mit physiologischer Kochsalzlösung 
genau wie bei Merz hergestellt, nämlich 1 : 200, 400, 800, 1000 usw. Vor 
genommen werden diese Verdünnungen in Reagenzgläsern, aus denen die 
